文档介绍：台湾环保署大肠菌检测方法简介
高瑞坤姜欣欣
(厦门市环境监测中心站厦门 361004)
摘要总大肠菌群(Total Coliforms)和大肠杆菌()是当前国内、外环境监测部门评价水体污染程度的公认指标和主要监测项目之一。本文介绍了台湾环保署应用酵素变色及荧光反应的方法,检测水中的总大肠菌群(Total Coliforms)和大肠杆菌(),可以在24小时获得检测结果,准确检测水中的总大肠菌群(Total Coliforms)和大肠杆菌()的数量。
关键词台湾环保署,大肠菌群,检测方法
1 范围
本方法适用于地面水、地下水、饮用水及水源水质中总大肠菌群(Total Coliforms)及大肠杆菌()之检测;但不适用于未处理的废水及污水之检测。
2 原理
本方法系利用总大肠菌群(Total Coliforms)能产生β-D-galactosidase酵素分解Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside(ONPG)之特性,使培养液形成黄色;以及大肠杆菌()产生之β-glucuronidase酵素分解4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide(MUG),使培养液在波长366nm之紫外光照射之下产生萤光,来判断水样中是否含有总大肠菌群(Total Coliforms)及大肠杆菌()。
3 试剂
Minimal Medium ONPG-MUG (MMO-MUG)培养基
(为美国IDEXX公司生产的商品化制品)
4 设备
量筒:使用100、500、1000 mL 之量筒。
吸管:使用1、5 及10 mL之无菌玻璃或无菌塑料吸管, mL。
稀释瓶:使用100、250、500及1000 mL能耐高压灭菌之玻璃制品,作为样品稀释及检测用。
采样容器:使用100、250 或500 mL能耐高压灭菌之硼硅玻璃制品。使用市售无菌袋亦可。
试管:可灭菌之玻璃或塑料制品,大小约15 mm×10 mm,或其它适当大小,可以容纳10 mL以上之水样者。
培养箱:温度能保持在35±1℃者。
:用于采样瓶、稀释瓶、试管及废弃样品等之灭菌。能以中心温度121℃灭菌15 分钟以上者。
干热灭菌器(烘箱):用于玻璃器皿等用具之灭菌。温度能保持在160℃达2 小时或170℃达1 小时以上者。
紫外光灯:6w、波长366 nm之紫外灯(含密闭可遮光之观测箱),可作为萤光反应之观察者。
定量盘:塑料制无菌定量培养用,含51个孔穴,每一孔穴可容纳2 mL的水样。
封口机:可作为51孔多管酦酵法(MPN)定量盘封口者。
5 培养基的主要成分
每1000ml商品化的Minimal Medium ONPG-MUG(MM0-MUG)培养基的所含基本成分:
硫酸铵(NH4)SO4
硫酸锰 Mn(SO4)2
硫酸锌 ZnSO4
硫酸镁 MgSO4 100mg
氯化钠 NaCl 10g
氯化钙 CaCl 50mg
亚硫酸钠 NaSO3 40mg
两性激素B A