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专题3 酵母细胞的固定化
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一、为什么要固定化酶
思考1、细胞中的酶,有的是游离的,也有的附着在生物膜上。有序排列在生物膜上的一系列酶可以催化连续的化学反应,这有什么好处?
分析:使生命活动更为_________和_________。
思考2、应用酶的过程中,人们发现了一些实际问题,例如:酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易_________;溶液中的酶很难回收,不能被___________,提高了生产成本;反应后酶会混在________中,可能影响产品质量。
思考3、有什么方法,可以使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时还可以被反复利用?
分析:将酶固定在__________________上,或者直接固定_________。
有序
高效
失活
再次利用
不溶于水的载体
产物
细胞
一、为什么要固定化酶有序高效失活再次利用不溶于水的载体产物细
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二、固定化酶的应用实例——生产高果糖浆
高果糖浆是指_____含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人类的健康更有益。
高果糖浆的生产需要使用________________酶,它能将_________转化成_________。这种酶的稳定性好,可以持续发挥作用。但是,酶溶解于葡萄糖溶液后,_____________________,造成很大的浪费。
使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种颗粒状的_________上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔的_________。__________无法通过筛板上的小孔,而____________却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出。
果糖
葡萄糖异构
葡萄糖
果糖
无法从糖浆中回收
载体
筛板
酶颗粒
反应溶液
二、固定化酶的应用实例——生产高果糖浆果糖葡萄糖异构葡萄糖果
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三、固定化酶和固定化细胞技术
概念:利用_______或_______方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。
物理
化学
包埋
化学结合
物理吸附
三、固定化酶和固定化细胞技术物理化学包埋化学结合物理吸附
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思考4、一般而言,固定化酶更适合采用化学结合和物理吸附法,而固定细胞多采用包埋法。原因是?
分析:体积大的_______难以被_____________,而体积小的_______容易从包埋材料中_______。
思考6、哪一种方法对酶活性的影响更小?_________
思考7、固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶?_________
思考8、如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法?_________
思考9、如果反应物是大分子物质,又应该采用哪种方法?
________________________
细胞
吸附或结合
酶
漏出
包埋法
一系列
包埋法
物理吸附法或化学结合法
思考4、一般而言,固定化酶更适合采用化学结合和物理吸附法
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不溶于水的多孔性载体
不溶于水的多孔性载体
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四、固定化酵母细胞的实验操作
1、制备固定化酵母细胞的流程
四、固定化酵母细胞的实验操作
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活化
CaCl2
海藻酸钠
海藻酸钠
蒸馏水
休眠
正常生活
搅拌
间断
冷却至室温
已活化
CaCl2
不溶于水的多孔性载体
活化CaCl2海藻酸钠海藻酸钠蒸馏水休眠正常生活搅拌间断冷却
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思考11、什么叫活化?为什么要提前完成?如何提高活化效果?
分析:活化是指________________________________________________。活化需要一定的时间,所以要提前完成。适当提高_________、加入一定量_________、延长活化_______,可提高活化效果。
思考12、活化时为什么要选用较大的容器?
分析:酵母菌活化时____________,较大的容器可以避免活化液________。
思考13、本实验中,CaCl2溶液的作用是什么?
分析:氯化钙溶液主要起聚沉的作用。刚形成的凝胶珠在氯化钙溶液中浸泡一段时间,钙离子可与海藻酸根离子鳌合成不溶于水的海藻酸钙凝胶,形成稳定的结构,使酵母菌更易固定。
让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态
温度
葡萄糖
时间
体积会变大
溢出
思考11、什么叫活化?为什么要提前完成?如何提高活化效果
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思考14、本实验中,海藻酸钠的浓度对凝胶珠的形态和颜色有哪此影响?
分析:如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏______,固定的酵母细胞数量______;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏_____,制作失误,需要再做尝试。
思考15、将海藻酸钠与酵母细胞混合前为什么要冷却?如何缩短冷却的的时间?
分析:冷却的目的是_____________________。将盛有海藻酸钠溶液的烧杯放到_________________中可缩短冷却时间。
思考16、若形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,成长条状或拖着小尾巴,可能的原因是?
分析:①海藻酸钠的浓度偏_____;②滴加混合液速度过_____;③滴加混合液高度太_____。
低
较少
高
防止高温杀死酵母菌
装有冰块的冷水
高
快
低
思考14、本实验中,海藻酸钠的浓度对凝胶珠的形态和颜色有
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