文档介绍：Sf-9细胞培养
实验指导
实验目的:
实验课是培养同学们独立工作和为了开展生物学及遗传研究工作打下基础,因此每位同学必须认为认真进行实验,发挥独立钻研的精神。但是遇到困难一定要及时向指导老师提问清楚。
学****和掌握昆虫细胞培养的操作技术,熟悉实验室的基本规则。为今后深入研究打好基础。
掌握实验室一些仪器的操作方法。
实验结束后提交规范的实验报告。(含照片和电子文档)
实验要求:
进实验室先洗手、签到。进细胞培养室要换鞋。
必须保持显微镜、试验桌、超净台以及其它用具的清洁和整齐,各种药品、试剂按照规定的用量进行使用。用完后要恢复摆放位置。
严格遵守显微镜使用的注意事项,否则损坏物镜,同时也影响试验的进行。
离开实验室前,必须检查水龙头和电开关,避免发生事故。
实验原理:
Sf-9
注释:Sf-. Smith 和 . Cherry 在1983年从细胞株IPLB-SF 21 AE得来的一个克隆。IPLB-SF 21 AE是1977年由Vaughn等从草地夜蛾蛹的卵巢组织得到的。
Sf-9是半贴壁的细胞,贴壁性不强。
Sf-9细胞的形态
培养细胞生长的条件
1 细胞的营养需要
2 细胞的生存环境
温度: 28℃
O2
pH: -
渗透压
3 无污染
4 无毒
培养液: Grace‘s Antheraea 培养液4℃保存。完整培养液在使用前加入10%热灭活的胎牛血清。
是属于人工合成培养基。
人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清)。
血清中含有:
①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)
②多种金属离子
③激素;
④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。
⑤各种生长因子
⑥转移蛋白
⑦不明成分