文档介绍：生物基因工程知识点高中生物选修3基因工程知识点
基因工程是高中生物学科的重点难点，你都掌握基因工程的知识了吗?接下来WTT为你整理了高中生物选修3基因工程知识点，一起来看看吧。
高中生物选修3基因工程知识点：基本工具
1.“分子手术刀”限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
(3)结果：经限制酶切割产生的DN***段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较：
①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DN***段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DN***段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”载体(1)载体具备的条：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DN***段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是­­质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
(3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒
高中生物选修3基因工程知识点：操作程序
第一步：目的基因的获取
： 编码蛋白质的结构基因 。
，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
(1)原理：DNA双链复制
(2)过程：第一步：加热至90～95℃，DNA解链;
第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链;
第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
第二步：基因表达载体的构建
：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够
表达和发挥作用。
：目的基因+启动子+终止子+标记基因
(1)启动子：是一段有特殊结构的DN***段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
(2)终止子：也是一段有特殊结构的DN***段 ，位于基因的尾端。
(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
第三步：将目的基因导入受体细胞_
：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
：
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方