文档介绍:高中生物基因工程知识点
凡事预则立,不预则废。学****生物需要讲究方法和技巧,更要学会对知识点进行归纳整理。下面是我为大家整理的,希望对大家有所帮助!
一
一、基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。
二、基因工程的原理及技术原理:基因重组技术
基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶限制酶
1来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
2功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。
3结果:经限制酶切割产生的DN***段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端.
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
1两种DNA连接酶E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶的比较:
①.相同点:都缝合磷酸二酯键。
②.区别:E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DN***段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
2与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DN***段的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体
1载体具备的条件:
①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点,供外源DN***段插入。
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。
2最常用的载体是质粒:
它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
3其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒
二
基因工程的基本操作程序
第一步:目的基因的获取
:编码蛋白质的结构基因。
,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。
1原理:DNA双链复制
2过程:①加热至90~95℃DNA解链;
②冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;
③加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成
第二步:基因表达载体的构建
:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
:目的基因+启动子+终止子+标记基因
1启动子:是一段有特殊结构的DN***段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所