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2021年高中(Zhong)生物基因工程焦点常识点
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专题1 基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿第 1 页
2021年高中(Zhong)生物基因工程焦点常识点
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专题1 基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望，进展严酷的设计，经由过程体外DNA重组和转基因手艺，付与生物以新的遗传特征，缔造出更合适人们需要的新的生物类型和生物产物。基因工程是在DNA分子程度长进展设计和施工的，又叫做DNA重组手艺。
(一)基因工程的根本东西
(限制酶)
(1)来历：主如果从原核生物中别离纯化出来的。
(2)功能：可以识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，而且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，是以具有专一性。
(3)成果：经限制酶切割发生的DN***段结尾凡是有两种形式：黏性结尾和平结尾。
(1)两种DNA毗连酶(EcoliDNA毗连酶和T4-DNA毗连酶)的比拟：
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①一样点：都缝合磷(Lin)酸二酯键。
②区别：EcoliDNA毗连酶来历于T4噬菌体，只能将双链DN***(Pian)段互补的黏性结尾之间的磷酸二酯键毗连起来;而T4DNA毗连酶能缝合两种结尾，但毗连平结尾的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶感化的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的结尾，形成磷酸二酯键。DNA毗连酶是毗连两个DN***段的结尾，形成磷酸二酯键。
(1)载体具备的前提：①能在受体细胞中复制并不变保留。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DN***段插入。
③具有标识表记标帜基因，供重组DNA的判定和选择。
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、构造简单的、自力于细菌染色体之外，并具有自我复制才能的双链环状DNA分子。
(3)其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒
(二)基因工程的根本操作法式
第一步：目标基因的获取
： 编码卵白质的构造基因 。
，真核基因是人工合成。人工合成目标基因的常用方式有反转录法_和化学合成法_。
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(1)道理：DNA双链复(Fu)制
(2)过程：第一(Yi)步：加热至90～95℃DNA解链;第二步：冷却到55～60℃，引物连系到互补DNA链;第三步：加热至70～75℃，热不变DNA聚合酶从引物肇端互补链的合成。
第二步：基因表达载体的构建
：使目标基因在受体细胞中不变存在，而且可以遗传至下一代，使目标基因可以表达和阐扬感化。
：目标基因+启动子+终止子+标识表记标帜基因
(1)启动子：是一段有特别构造的DN***段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和连系的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的卵白质。
(2)终止子：也是一段有特别构造的DN***段 ，位于基因的尾端。
(3)标识表记标帜基因的感化：是为