实验四 肠道杆菌.ppt

文档介绍：注意: 不要打开培养皿!!!
实验四肠道杆菌
病原生物学教研室
涂增
实验目的:
了解常见肠道杆菌的生物学特性及分离鉴定程序.
掌握肠道杆菌在选择、鉴别培养基上生长/选择/鉴别的原理和现象.
掌握药敏试验的原理的方法
实验内容
肠道杆菌的生物学特性、致病与检测(录像).
肠道杆菌的分离鉴定程序介绍.
肠道杆菌在选择/鉴别培养基上生长现象观察.
药敏试验(纸片法).
、致病与检测(录像):
临床症状
粪便
血液、尿液、脑脊液
接种选择培养基(中国兰、ss琼脂平板、伊红美兰平板…)
挑选无色菌落
接种鉴别培养基(双糖含铁培养基)
增菌
生化反应最终鉴定
药敏试验
乳糖发酵试验可以用来初步鉴别肠道致病菌还是非致病菌:能发酵乳糖产酸的为非致病菌;不能发酵乳糖的为致病菌。
EMB
:
(1)( Salmonella & Shigella agar plate)
培养基成分:基础培养基营养物
乳糖红黄
中性红(酸碱指示剂—-,)
煌绿、胆盐、枸橼酸钠等:抑菌
菌种:大肠杆菌伤寒杆菌
(2)EMB(Eosin-methylene blue agar plate)
培养基成分:基础培养基营养物
乳糖
伊红、美兰:抑菌;酸性条件下结合染色
菌种:大肠杆菌伤寒杆菌
EMB 平板
琼脂平板
伤寒杆菌
无色菌落
无色菌落
大肠杆菌
深紫色,带金属光泽
红色菌落
E. Coli EMB
E. Coli SS
----双糖含铁培养基(Double Sugar Iron Agar)
培养基成分:
上层:蛋白胨、***化钠、乳糖、硫酸亚铁、硫代硫酸钠、
下层:蛋白胨、***化钠、葡萄糖、琼脂和酚红指示剂. 半固体培养基,穿刺接种。
观察内容:
上层颜色
上下层交界颜色
下层颜色
下层气泡/气柱
下层接种线
肠道杆菌的生化反应
培养基
观察内容
大肠杆菌
痢疾杆菌
伤寒杆菌
乙型副伤寒杆菌
上层
(固体)
乳糖发酵试验
+
-
-
-
H2S试验
-
-
-
+
下层
(半固体)
葡萄糖发酵试验
+
+
+
+
动力实验
+
-
+
+