文档介绍：荧光分光光度法测定水产品中的石油烃-畜牧渔业论文
荧光分光光度法测定水产品中的石油烃
马瑞欣1,2,苏欢欢2,梁艳红2,孙伟彬2,3,安志业3,张勇1
(,石家庄 050011;
, 石家庄 050035;,石家庄 050011)
石油是一种成份复杂的混合物,主要包括饱和烃、芳香烃类化合物、沥青、树脂类等。随着石油工业的发展,石油烃已成为造成海洋污染的主要物质之一,特别是其中的芳香烃类化合物是对水生生物构成危害的主要部分。水中的石油烃能被吸附于水体中的悬浮颗粒和胶体颗粒,鱼类通过体肤渗透、呼吸代谢蓄积在体内,造成鱼类体型弯曲畸形,影响鱼类的生长繁殖。双壳贝类由于从水中摄食悬浮颗粒和胶体颗粒,对石油烃的富集能力很强,石油烃可抑制双壳类的免疫力,增强疾病的易感性;水中的石油烃被鱼贝富集后,通过食物链危害人体健康。目前生物体内的石油烃测定方法主要有紫外法[1]、荧光分光光度法[2-5]。-2007中石油烃的测定采用荧光分光光度法,但该方法检测批量样品时,可操作性差。因此本文对实验条件进行了研究和改进,以适用于批量样品的检测,并对实验应注意的问题进行了总结。
1材料与方法
荧光分光光度计(日本日立,F-7000)、涡旋混合振荡器(Ms3,广州仪科)、数显恒温振荡器(上海梅香,SHY-2)、千分之一电子天平(赛多利斯CP323S)、万分之一电子天平(赛多利斯,BT224S)、超纯水仪(millipore)、离心机(湖南湘仪,TDZ5-WS)。
脱芳石油醚(色谱纯或分光纯,沸点60~90 ℃);无水乙醇(色谱纯);氢氧化钠(优级纯),氯化钠(优级纯),二氯甲烷(色谱纯);
标准贮备溶液:购自国家海洋环境监测中心,浓度1 000 μg/mL,采用20号重柴油和润滑油为原料配制而成。
实验所用水为超纯水。
2实验方法
贝类:用蒸馏水洗净贝壳外部附着物,取软体组织和体液匀浆后放入磨口玻璃瓶中,-20 ℃保存备用。
鱼类、虾类等取可食部分匀浆,放入磨口玻璃瓶中,-20 ℃保存备用。
称取样品2~5 g于100 mL皂化瓶中,加入20 mL 6 mol/L氢氧化钠溶液,涡旋混合均匀,放入35 ℃恒温水浴振荡器中避光振荡11 h,加入20 mL 无水乙醇,涡旋振荡,放置4 h后,转入250 mL分液漏斗中,用10 mL二氯甲烷洗涤皂化瓶,洗涤液转入250 mL分液漏斗中,加入30 mL饱和氯化钠溶液、100 mL水,充分振荡,静止分层,下层放入100 mL鸡心瓶中,再用10 mL二氯甲烷洗涤皂化瓶后转移到250 mL分液漏斗中进行萃取,萃取液合并到100 mL鸡心瓶中,40 ℃旋转蒸发至干, mL石油醚定容,涡旋混匀30 s,转移到10 mL玻璃试管中,4 000 r/min 离心5 min,上清液供荧光分光光度计测试使用。
取贮备液用石油醚稀释成100 μg/mL的使用液,分别取0 mL、 mL、 mL、 mL、 mL、 mL、 mL置于皂