实验三 PCR扩增制备目的基因 PPT课件.ppt

文档介绍：基因工程实验课
新乡医学院生命科学实验示范中心
办公电话:3029114
主讲人:王兴平
E-mail:nwsuafwxp@
PCR扩增制备目的基因
一、实验目的
熟悉PCR的基本原理
学会PCR操作的基本技术
制备目的基因
二、实验原理
三、实验器材、试剂
:旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头, PCR微量管,双面微量离心管架,PCR仪,台式离心机,琼脂糖凝胶电泳系统,(灭菌)、移液器吸头(灭菌)。
:3U/μl Taq DNA聚合酶,PCR缓冲液(10×,MgCl2 free),25mM MgCl2,dNTP,引物,模板质粒,无菌dd water。 dNTP混合液(每种25mM),合成的引物,TAE电泳缓冲液,1000溴化乙锭储存液(),10加样缓冲液.
四、操作步骤

所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。
操作过程中均应戴手套。
PCR试剂配制应使用最高质量的新鲜双蒸水。
试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
五、注意事项