文档介绍：抗体及其制备技术
抗体的概念和分类、分子结构
抗体产生的细胞学基础
抗体-抗原的反应
抗体的制备
单克隆抗体的制备
其它常用的亲和反应
Antigens
Substance recognized as “foreign”
Hapten: foreign substance that binds antibody; does not elicit immune response
Immunogen: foreign substance that binds antigen and elicits immune response
Carrier: large protein
Hapten + Carrier = Immunogen
Epitope: part of antigen that is recognized by antibody
Immunodominant site: epitopes that are more highly charged or more accessible
1. 抗体的概念和分类
抗体概念的发展
在19世纪末叶和20世纪初期,细菌学家们就已发现宿主感染细菌后,血清中出现具有防御作用的保护成分。人们对这些血清成分起了各种不同的名称,如抗***、杀菌素、溶菌素等。直到30年代才统称为抗体(antibody,Ab)。
Tiselius和Kabat(1939)用电泳揭示了抗体的活性存在于泳动度最慢的血清组分,即γ—球蛋白(丙种球蛋曰,gammaglobulin、γG、GG)内。血清中抗体经抗原吸收后再经电泳,则又恢复到与正常血清的图谱一样,认为抗体是γ—球蛋白,并将它作为同义词互用。
Immune serum
Ag adsorbed serum
1
2
+
-
albumin
globulins
Mobility
Amount of protein
抗体活性的球蛋白并不都泳动至γ位反之,在γ球蛋白也不一定都有抗体活性。
在1968年和1972年,世界卫生组织和国际免疫学会联合会决定,将具有抗体或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白
抗体的分子结构
人和动物的抗血清清中的免疫球蛋白是极不均—,50年代以后,由于蛋白质分离和提纯技术的进展,以及多发性骨髓瘤患者血清中出现大量均一的免疫球蛋白(占血清免疫球蛋白的95%),从而提供了实验方法和材料来源,使免疫球蛋白的研有了重大突破。
现在有关抗体理化性状、分子结构、免疫活性等本质问题已基本被阐明
Antibody Structure
Fab
Fc
Heavy chain
Light chain
C-terminus
N-terminus
Fab
-ss-
ss
ss
papain (2 Fab fragments)
pepsin ( 1 Fab fragment)
Interchain disulfide bonds stabilize domain structure which is tied to Ig function; differences in Ig molecular weight due to differences in heavy chains
Variable region antigen binding site
Cellular binding site