文档介绍：附录A  
培养基和试剂 
 
月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤 
 
成分
  g 
*** g 
  g 
磷酸氢二钾(K2HPO4) g 
磷酸二氢钾(KH2PO4) g 
 g
 蒸馏水1 000 mL 
pH ±
制法
将上述成分溶解于蒸馏水中,调节pH。分装到有玻璃小倒管的试管中,每管10 mL。121 ℃高压灭菌15 min。
菌落总数检验操作规程
目的
建立菌落总数检验的标准操作程序,使操作过程规范化。
适用范围
适用于菌落总数的检验操作。
职责
检验人员
严格按检验操作规程进行检验。
QC主管
监督检查执行情况。
程序
本方法适用于食品中菌落总数(Aerobic plate count)的测定
菌落总数:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
3. 设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃。
:2 ℃~5 ℃。
恒温水浴箱:46 ℃±1 ℃。
:感量为 g。
。
。
:1 mL(具 mL 刻度)、10 mL(具 mL 刻度)或微量移液器及吸头。
无菌锥形瓶:容量 250 mL、500 mL。
:直径 90 mm。
pH计或 pH比色管或精密 pH试纸。
。
平板计数琼脂培养基:见附录 A 中 。
磷酸盐缓冲液:见附录 A中
无菌生理盐水:见附录 A中 。
菌落总数的检验程序见图1。
检样
25g(mL)样品+225 mL 稀释液,均质
10倍系列稀释
选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液,
各取1 mL分别加入无菌培养皿内
每皿中加入15 mL~20 mL
平板计数琼脂培养基,混匀
培养
计数各平板菌落数
计算菌落总数
报告
图1 菌落总数的检验程序
样品的稀释
固体和半固体样品:称取 25 g 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min 均质 1 min~2 min,或放入盛有 225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min~2 min,制成 1:10 的样品匀液。
液体样品:以无菌吸管吸取 25 mL 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成 1:10 的样品匀液
1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取 1:10 样品匀液1 mL,沿管壁缓慢注于盛有 9 mL 稀释液的无菌试管