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结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ、IL-2)联合检测在肺外结核诊断中的临床价值.pdf

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结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ、IL-2)联合检测在肺外结核诊断中的临床价值.pdf

上传人:1781111**** 2024/5/7 文件大小:801 KB

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文档介绍:该【结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ、IL-2)联合检测在肺外结核诊断中的临床价值 】是由【1781111****】上传分享,文档一共【9】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ、IL-2)联合检测在肺外结核诊断中的临床价值 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。:..结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ、IL-2)联合检测在肺外结核诊断中的临床价值【摘要】目的:分析结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ、IL-2)联合检测(双因子检测)在肺外结核诊断中的临床应用价值。方法:对本院2020年11月-2021年9月入院的63例临床诊断为肺外结核的患者以及52例非结核患者进行双因子联合检测、-干扰素释放试验(T-spot检测)以及PPD检测,对结果进行分析。结果:对入组的115例患者行双因子联合检测、T-spot检测及PPD检测,对检测结果进行分析得,双因子并联检测、串联检测、T-%、%、%%;双因子并联检测、串联检测、T-%、%、%%。双因子并联检测灵敏度高于T-spot检测,串联检测特异性高于T-spot检测和PPD检测。结论:在肺外结核的诊断中,双因子并联检测的灵敏度高于T-spot检测,使用双阳性为阳性指标的串联检测的特异性高于T=spot和PPD检测。双因子检测在传统-干扰素释放试验基础上增加了对IL-2的检测,实现了对肺外结核感染的特异性检出,在肺外结核的诊断上有非常重要的临床价值。【关键词】肺外结核,IFN-γ,IL-2,双因子结核病是全世界十大死亡原因之一,根据2020年WHO发布的全球结核病报告显示,中国作为全球的30个结核病高负担国家之一,2019年结核病发病率为58/10万人,,2,其中很大一部分是肺外结核的患者,相比于肺内结核这一部分患者极易被忽略,是不可忽视的结核病传染源。目前临床上有关肺外结核的诊断方式大多具有一定的局限性。主要诊断方式包括患者患处组织以及穿刺物的抗酸染色以及结核分枝杆菌培养,结核菌素试验,针对结核分枝杆菌的抗体检测法,荧光定量PCR法,和γ干扰素释放试验等3-7。:..其中抗酸染色法与结核分枝杆菌培养方法由于患者患处部位组织难取得,且穿刺法对患者会有创伤伤害,取材有一定困难,均存在耗时长的问题,尤其抗酸染色有人为影响的因素。γ干扰素释放试验采集患者外周静脉血进行检测,对刺激后产生分泌γ干扰素的外周血单个核细胞进行定量检测,通过数量来判断患者是否感染了结核分枝杆菌,并且相比结核菌素试验、抗体检测等诊断方法具有更高的灵敏度,但是γ干扰素释放试验结果仅提示结核感染,不能区分活动性结核与潜伏感染,其阳性结果不能确定有活动性结核,因为在我国结核潜伏感染人群较多,其阳性预测值不足5,8。因此一种取材简便,方便快速,准确高效的方法是目前临床诊断肺外结核所需要的。近年来,针对活动性结核特异性诊断的方法研究层出不穷,不少研究团队发现,活动性结核患者与结核潜伏感染者体内白介素2水平显著升高9,10,对活动性结核患者外周血单个核细胞进行结核分枝杆菌特异性抗原刺激,相对于非活动性结核患者其IL-2水平也有显著变化11,12。其中,广州迪澳医疗科技有限公司的结核分枝杆菌特异性细胞因子检测试剂盒(酶联免疫法)()是首个获得国家审批的结核特异性IFN-γ、IL-2双因子联合检测的结核病诊断产品,该方法在原有的γ干扰素释放试验增加了结核特异性IL-2释放试验,用于提高检测特异性。本研究将使用该试剂盒,研究结核特异性IFN-γ、IL-2联合检测对肺外结核诊断的效果。(以下简称为“我院”)收治的133例患者为研究对象。按照入组标准,排除15例诊断为肺结核的患者,2例陈旧性结核以及1例非结核分枝杆菌感染的患者,排除后的115例根据诊断结果分为肺外结核组与非结核组。其中肺外结核组63例,男性25例,女性38例,;非结核组52例,男性31例,女性21例,。:..(每份不少于4mL)至含肝素抗凝剂采血管中,加入等体积RPMI-1640(厂家:天津灏洋,货号:HY1640,规格:500mL/瓶)混匀后以2-3:1加入到淋巴细胞分离液(厂家:天津灏洋,货号:HY2015,规格:200mL/瓶)上层,室温梯度离心后吸取单个核细胞(PBMCs)层至RPMI培养液,计数后根据数量稀释至工作浓度,取50uL无血清培养基至空白对照孔,50uL结核特异性融合蛋白至检测孔,50uL阳性刺激物至阳性对照孔,之后加入配好浓度的细胞悬液,37度培养16-20小时。本研究采用结核分枝杆菌特异性细胞因子检测试剂盒(酶联免疫法)()(厂家:广州迪澳医疗科技有限公司,货号:DM001S,规格:28人份/盒)分别检测IFN-γ以及IL-2的含量,实验操作严格按照说明书步骤进行。,使用卡方检验,对各个实验组结果阳性率,灵敏度,特异性进行检测与统计学分析,结果之间比较采取T检验,P<。(见表一)。:..肺外结核(63例)非结核(52例)P男(例)(例)3821年龄(岁),即IFN-γ与IL-2同时或其中之一满足阳性即判断为阳性时,为并联检测;当以IFNγ和IL-2同时阳性为阳性标准时,为串联检测,统计结果如下表(表二)。-γ(+)IL-253053:..(+)IFN-γ(+)IL-27310(-)IFN-γ(-)IL-2000(+)IFN-γ(-)IL-234952(-)、T-spot检测与PPD检测结果比较以临床诊断结果为标准,对肺外结核组的63例患者与非结核组的52例患者分别进行双因子检测、T-spot与PPD检测结果的回顾性分析,三种方法检测结果的分析统计(见表三)。-spotPPD测:..%%%%结核3(60/63)(53/63)(59/63)(60/63)%%%%核2(3/52)(0/52)(1/52)(31/52)注:表中数值为“阳性率”,括号内分子为阳性例数,分母为总检查例数。双因子并联检测、串联检测、T-%、%、%%,双因子并联检测灵敏度与PPD检测相同,高于T-spot检测,差异无统计学意义(P=)。双因子串联检测、并联检测、T-%、%、%%,串联检测特异性高于T-spot检测,差异无统计学意义(P=),以及PPD检测,差异有统计学意义(P=)。,肺外结核的发病占整个结核病发病的10%~20%,%~%13,14。绝大多数的肺外结核是由结核分枝杆菌先侵染肺部后再通过血液或者淋巴系统向人体其他组织器官播散的结果,也有部分是由于肺结核的治疗不规范与过早停药导致结核分枝杆菌播散至其他部位产生感染15。肺外结核一般在前期并无明显的全身症状,且易被其他病症所掩盖,导致对该疾病的早期诊断较难,误诊与漏诊率较高,会影响脏器功能甚至危及生命,这些对肺外结核的早期准确诊断提出了很高的要求16。另一方面肺外结核由于其样本采集困难,样本采集细胞量少,含菌量不足,在诊断方面一直存在比较大的困难17。临床对肺外结核使用的诊断方法,最为常见的是穿刺抽液检查(血生化、常规、涂片、培养等),由于该方法涉及到提取病灶处的组织,其有创性会对患者:..带来痛苦不适18。而常规的结核诊断方法中,病原学检测的涂片法,灵敏度和特异性较差;培养所需时间周期长,一种快速,准确,对患者伤害较少的诊断方法对肺外结核的诊断是十分必需的19。传统的免疫学检测方法,γ干扰素释放试验(IGRA)具有样本获取方便,诊断快速,检验灵敏度高等优点,夏厦等使用IGRA检测对213例临床诊断为淋巴结病变的患者进行淋巴结结核的检测,%%20。我们的研究结果显示,结核特异性IFN-γ、IL-2联合检测的试剂盒标准-%,%,使用双阳为诊断标准-%,%,并联检测灵敏度高于T-%,串联检测特异性高于T-%%。在对这批患者的诊断中,结核特异性细胞因子联合检测展示了对于肺外结核的特异性检出。相比于传统的IGRA试验,联合检测增加了IL-2这一结核特异性靶标,提高了检测的准确度,弥补了传统IGRA试验特异性不足的缺点,具有非常重要的临床价值以及研究意义。另一方面,由于本次研究的临床样本数量有限,需要更广泛的临床研究来进一步验证该结论。参考文献1Harding,,19,doi:-2600(19)30418-7(2020).2Chakaya,-ReflectionsontheGlobalTBburden,,doi:.(2021).3Liu,-,233-240,doi:(2019).4黄蓉飞,蔡玮,樊元春,(5)(2020).:..5郭琪,胡娇,(20),63-65(2018).6艾尼瓦尔·艾力,阿不都合力里,热木提拉,李健,-(10),1424-1425(2015).7Raja,R.,Sreeramulu,.,Dave,P.&Srinivasan,-Acutting-,100204,doi:.(2020).8郑松,程洁,王殿超,李梅,(3),306-308(2018).9Suzukawa,-gamma,IL-2,IL-5,IL-10,IL-1RAandMCP-,e0152483,doi:.0152483(2016).,.,,-2inadditiontointerferon-γdiscriminatesactivetuberculosispatients,latentlyinfectedinpiduals,,1282-1284(2010).11Zhang,-gamma/IL-2FluoroSpotassayfordistinguishingactivetuberculosisfromnon-activetuberculosis:,64-69,doi:.(2019).12Suter-Riniker,-2/gammainterferonratiosinMycobacteriumtuberculosis-specificT-,1395-1396,doi:-11(2011).:..13黄建生,沈梅,(10)(2000).14刘剑君,(5)(2006).15张蔚,梁瑞韵,(10)(2002).16许宾,孙加源,(3)(2004).17赵金云,陈雪芳,许文芳,(7)(2021).18江红,(1)(2012).19欧维正,雷毅娜,(3)(2021).20夏厦,张国英,&ClinMed26(6)(2019).注:(穗卫函[2019]1555号);(2021-2023年)项目;:广州地区学校结核病防控策略研究(项目编号:2020A031003);