文档介绍:第七章检疫性植物病毒
检疫性植物病毒的检验方法
番茄环斑病毒
马铃薯帚顶病毒
*其他检疫性植物病毒
南方菜豆花叶病毒、可可枝肿病毒、香石竹环斑病毒
了解检疫性植物病毒的种类、分布及重要性,掌握植物检疫性病毒的检验方法,掌握番茄环斑病毒、马铃薯帚顶病毒引起病害的症状、病原特性、寄主范围、病害的发生发展规律以及检验措施。
检疫性植物病毒的检验方法
生物学检测技术
血清学检测技术
电子显微镜技术
分子生物学检测技术
原理:
植物病毒对鉴别寄主或指示植物的特异反应。
鉴别寄主谱:
对一种病毒有特殊反应的一组寄主,一般包括3~5种不同反应类型的寄主植物。一般包括:
系统侵染的寄主
局部侵染的寄主
不受侵染的寄主
例1,TMV和CMV在田间烟草植株上都呈花叶症,为了确定是否有TMV,或是将两者区分开,便可通过下列三种植物的接种来确定。
原理:
抗原与抗体的特异结合
方法:
免疫电泳和免疫电镜、琼脂双扩散、ELISA等。
两种抗原相同,都与已知的抗血清反应
琼脂双扩散反应沉淀线判断图
抗原1
抗血清
抗原2
抗血清不专化含有两种以上的抗体
抗原2
抗原1
抗原2
抗原1
抗血清
抗血清
两种抗原有一定的亲缘关系但不完全相同
原理:
以电磁波为光源,利用短波电子流,Å,比光学镜要高1000倍以上
主要方法:
超薄切片、负染技术、免疫电镜技术
分子杂交检测
PCR技术检测
分子杂交
在DNA和RNA之间进行,依据是RNA与互补的DNA之间存在着碱基的互补关系。
在一定的条件下,RNA--DNA形成异质双链的过程称为杂交。其中预先分离纯化或合成的已知核酸序列片段叫做杂交探针(probe),由于大多数植物病毒的核酸是RNA,其探针为互补cDNA也称为cDNA探针。