文档介绍：免疫学检测技术
中卫市第一人民医院
魏玉红
一、免疫学检验原理
抗原-抗体反应:指抗原与相应抗体在体内、外发生高度特异性结合反应。由于实验所用的抗体存在于血清中,故又称血清学反应(serological reaction)
应用:
用已知抗原检测未知抗体;
用已知抗体检测未知抗原:
定性或定量检测体内各种分子;
用已知抗体检测半抗原物质。

特异性:一种抗原通常仅能与由它刺激所产生的抗体结合。
分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性。
(一)抗原-抗体反应的特点
交叉反应(cross reaction)性:若两种抗原分子有一个或数个相同(或相似)的决定基,则针对一种抗原的抗血清可与另一种抗原发生反应。
结合价:
天然抗原分子表面一般含多种抗原决定基,可与多个抗体分子结合,为多价。单体形式的抗体分子有两个Fab段,能结合两个相同的抗原决定基,为两价。

比例合适:
若抗原、抗体的数量比例合适,抗体分子的两个Fab段分别与两个抗原决定基结合,相互交叉连接成网格状复合体,则反应体系中基本不存在游离的抗原或抗体,此时形成肉眼可见的反应物(沉淀物或凝集物)。
因此,确定反应体系中抗原、抗体的最适比例十分重要。
前带现象(prozone)和后带现象(postzone)
Ab过剩和Ag过剩
抗原和抗体结合是否呈现可见的反应现象,与两者的浓度和比例密切相关
网格学说(lattice theory)
抗体过剩
抗原过剩
抗体抗体比例合适
抗原
抗体
抗原-抗体反应为分子表面的非共价结合,结合虽稳定但可逆。在一定条件下(如低pH、高浓度盐、冻融等),抗原-抗体复合物可被解离。解离后的抗原和抗体仍保持原有理化特性和生物学活性。
根据此特点,可借助亲和层析法纯化抗原或抗体。

抗原抗体反应可分为两个阶段
特异性结合阶段:反应快,不可见。
可见的反应阶段:反应慢,出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象。