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201 4 年 1 2 月第 8 卷第 23 期 For all Health 中医中药
,SCP 高、中、低剂量组能不同程度的降低肿瘤细胞 Bcl -2 蛋白的表达
实验仪器(%、%、%),增加 Bax 蛋白的表达(%、%、
使用北京医用离心机厂生产的低速离心机,其型号为 LD4 -2A 型; %),并且具有一定的剂量依赖关系。
型号为 AvantiTM68 centrifuge,BECKMAN 型的低温高速离心机;GIS -
2008 天能凝胶成像分析仪,上海天能科技有限公司。细胞凋亡是细胞程序性死亡的一个重要表现,整个凋亡过程涉及多
药物和试剂种凋亡因子的调控,包括了激活因子、凋亡促进基因和抑癌基因等。在凋
使用我院自制的五味子多糖(SCP),通过苯酚-硫酸检测法测定其亡过程中伴随着细胞质和染色质浓缩、细胞核崩解、细胞膜皱缩,最后形
纯度为 %;Annexin V -FITC 凋亡试剂盒购于碧云天生物试剂公司; 成凋亡小体。近年来的研究发现,许多肿瘤不仅存在细胞增殖,同时也存
免疫组化试剂盒购于南京建成生物有限公司;Bcl -2、Bax 抗体购于武汉在细胞凋亡受阻,二者的不平衡状态是导致肿瘤恶性生长的基础[5]。研
博士德生物公司。究表明很多抗肿瘤药如环磷酰***、顺铂等都可以促进肿瘤细胞凋亡,因此
实验分组与给药有人认为其抗肿瘤作用机制主要是诱导细胞凋亡。研究发现,一些肿瘤
结肠癌 SW480 细胞由中国科学院上海细胞生物学研究所提供。将细胞对化疗药物敏感性强于正常的细胞,所以在设计抗肿瘤药物时可以
SW480 细胞分为对照组、SCP 低剂量组(10mg /ml)、SCP 中剂量组(20mg / 考虑选择能够诱导肿瘤细胞凋亡的药物。研究表明一些从中药中提取的
ml)和 SCP 高剂量组(40mg /ml)等四组。将细胞接种于 96 孔板,每组细活性成分能有效抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡。SCP 是从传统
胞 5 副孔,置于 CO2 培养箱 37℃环境中培养,接种 24h 后加入不同浓度的中药五味子提取得来的大分子化合物,具有一定的抗肿瘤作用。本研究
SCP 后继续培养 24h,检测各项指标。结果显示,不同剂量的 SCP 作用 24 小时后均能不同程度的抑制结肠癌
统计学分析 SW480 细胞的增殖,诱导肿瘤细胞的凋亡,同时能够降低 Bcl -2 蛋白的
使用计算机统计学软件 对数据资料进行回顾分析,用(x¯ 表达,增加 Bax 蛋白的表达,具有一定的剂量依赖关系,表明 SCP 能够抑
±s)代表计量数据,比较组件均数时,使用单因素方差分析,进一步比较制结肠癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡与其影响凋亡相关蛋白的表达密
时,使用 SNK -q 进行检验,将 P < 作为具有显著的统计学差异意义切相关。
的检验标准。综上所述,SCP 具有一定的抗结肠癌的作用,本研究为 SCP 将来成为
,其具体作用机制有待进一步
SCP 对结肠癌 SW480 细胞增殖的影响研究。
MTT 结果显