文档介绍：小鼠葡萄糖 6 磷酸脱氢酶(G6PD)酶联免疫分析试剂盒
使用说明书
产品编号:E0716m

本试剂盒仅供体外研究使用!
预期应用
ELISA 法定量测定小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中葡萄糖 6 磷酸脱氢酶(G6PD)
含量。

实验原理
本试剂盒应用竞争酶标免疫分析法测定标本中 G6PD 水平。用纯化的特异抗体包被微孔板,
制成固相抗体,实验时往微孔中先后加入 G6PD 标准品或受检标本和生物素标记 G6PD,使之
与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则生物素标记抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检
标本中含有抗原,则与生物素标记抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了生物素
标记抗原与固相载体结合的机会,使生物素标记抗原与固相载体的结合量减少。洗涤,依次加
入 HRP 标记的亲和素、反应底物,TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 G6PD 呈负相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定
吸光度(OD 值),利用标准曲线可以计算出样品中 G6PD 的含量。

试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板:一块(96 孔)
2. 标准品(冻干品): 2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至 ,盖好后静置 10 分钟
以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为 50 mIU/mL,做系列倍比稀释(注:不要直
接在板中进行倍比稀释),分别稀释成 25 mIU/mL, mIU/mL, mIU/mL,
mIU/mL, mIU/mL, mIU/mL,样品稀释液直接作为空白孔 0 mIU/mL,临用前
15 分钟内配制。如配制 25 mIU/mL 标准品:取 ml (不要少于 ml ) 50 mIU/mL
的上述标准品加入含有 ml 样品稀释液的 Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以
此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml。
4. 检测稀释液 A:1×10ml。
5. 检测稀释液 B:1×10ml。
6. 检测溶液 A:1×60μl(1:100)临用前以检测稀释液 A 1:100 稀释,稀释前根据预先计算
好的每次实验所需的总量配制(50μl/孔),实际配制时应多配制 -。如 10μl 检
测溶液 A 加 990μl 检测稀释液 A 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液 B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液 B 1:100 稀释。稀释方法同检测
溶液 A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释 25 倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11. 覆膜:5 张
12. 使用说明书:1 份

自备物品
1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)
2. 微量加液器及吸头,EP 管
3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸

标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置 2 小时或 4℃过夜后于 1000 x g离心 20 分钟,取上