文档介绍：⋯一一林听听谨以此论文献给所有关心、支持和帮助过我的亲人、师长禾口朋友
,锄讹巡叠公斜级孪栉孑缺劬励缈知船厂血细胞酶联免疫检测试剂盒≥汤:泛的研制与应用学位论文完成日期:生垒目指导教师签字:答辩委员会成员签字:少,
学位论文作者签名:恸学位敝作者签名:率喟修互签字日期.#騄月纠日签字日期:山存乱譮日独创学位论文版权使用授权书声明也不包含未获得垫逡查基丝重要挂别直明的关ㄖ或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ
栉孔扇贝细胞酶联免疫检测试剂盒的研制与应用摘要血细胞是贝类生物细胞免疫的主要执行者,是抵御外来病原侵袭和环境刺激的主要“屏障QO赴考鞍诿富畹谋涠梢宰魑R桓鲇糜谥甘旧缺词懿原感染或环境胁迫的免疫指标。本论文研究了栉孔扇贝经病毒感染和多糖刺激后血细胞数量及胞内酶活的变化规律;分类、分离了栉孔扇贝各种类型血细胞,以此为抗原研制出了抗各种类型血细胞的单克隆抗体:利用单抗制备了检测扇贝血细胞的酶联免疫约梁校挥τ檬约梁屑嗖饬松缺在自然生长及胁迫环境下的血细胞变化;旨在为评估扇贝的健康状况提供手段和理论依据。本论文主要包括以下糠郑慰咨缺淳《靖腥竞蟮难O赴浠貌煌ǘ、ā。。‘ā石和的栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒,。病发温度工感染扇贝,观察感染后各浓度组的存活率,确定了!。‘=鲜室说母染浓度。分别以和刹《九ǘ热斯じ腥旧缺矗腥竞竺刻觳舛ㄑO赴苁⒀O赴谒嵝粤姿崦、碱性磷酸酶⒊趸锲缁⒎友趸⑺韫趸锩和过氧化物酶谋化,共测定天。结果显示:感染后前天,灾档停鳤、、灾撸琍无明显规律,幢患觳獾剑焊腥旌螅髅疫指标逐渐恢复到对照值。此外,浓度对各免疫指标的影响幅度要大于度。结果表明:血细胞在应激病毒感染过程中起着关键作用。慰咨缺淳冢暇厶谴碳ず蟮难O赴浠直鹪钍饰露和。澡慰咨缺醋⑸.../的暇厶牵⑸浜竺∈辈舛═和胞内、和谋浠膊舛天。结果显示:时,.../组均显著升高;而在、、组,琒和../组,虯分别在甇和组被显著激活。时,辉./组显著升高;在和组,../组,./组被显著激活,而琈/栉孔扇贝血细胞酶联免疫检测试剂盒的研制与应用
和蛭幢患せ罨蛭幢患觳獾健4送猓琓、、蚐在℃时的提升幅度和持续时间不及℃。结果表明:血细胞在应激高温和暇厶谴碳过程中起着关键作用;而高温能削弱扇贝识别和结合外源刺激物的能力,从而增加了被侵染的机率。垢髦掷嘈脱O赴牡タ寺】固宓难兄朴肞不连续密度梯度、、和%胄姆ǚ掷肓髓慰咨缺慈O赴D啡旧ê土魇较赴术鉴定了各层血细胞的成分,确定了.%界面层为透明细胞,而.%界面层为颗粒细胞。分别收集透明细胞和颗粒细胞免疫小鼠,细胞融合,间接免疫荧光法筛选,克隆,所得单抗再经流式免疫荧光法蚖法匦苑治觥=峁允荆汗采秆】寺〉玫株既抗透明细胞和又抗颗粒细胞的单抗,,,株只抗颗粒细胞的单抗挥械玫街豢雇该飨赴牡タ埂5タ的阳性率为:%,其中阳性透明细胞占士%,,能与多个血细胞蛋白结合。,和难O赴蛋白结合。%,%,·。梯度稀释抗原抗体,迮痰味ǚㄈ范ǹ乖固宓淖罴咽褂孟∈投取8呶℃筒《刺激栉孔扇贝,觳飧鞔碳ぬ跫碌难O赴浠猿N潞高温刺激的比较结果制定扇贝正常状态与受环境胁迫的临界范围,以未感染和病毒感染的比较结果制定扇贝受环境胁迫与病原感染的临界范围,建立评估标准。最后组装制备试剂盒。结果显示:单抗哐粜月矢撸雇该飨赴涂帕O赴及抗原决定簇丰富的特性被确定为试剂盒的第一抗体。抗原和抗体的最佳使用稀释度为抗原稀释叮固逑∈倍。待检样品┲,属体质正常范围;待检样品局,属病原感染范围;两者之间为环境栉孔扇贝丘,血细胞酶联免疫检测试剂盒的研制与戍用;口口
关键词:栉孔扇贝;血细胞;酶联免疫试剂盒:单克隆抗体胁迫范围。试剂盒包括酶标板,封闭液,单抗钚粤姿崦昙堑难抗鼠抗体,显色液,栉孔扇贝血细胞