文档介绍：实验八肠道杆菌
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实验目的:
观察大肠杆菌,伤寒杆菌在SS琼脂平板和在EMB琼脂平板生长状态。
观察大肠杆菌,伤寒杆菌在双糖含铁斜面的菌落特点。
五糖发酵试验。
吲哚试验。
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一、肠道鉴别培养基
1、SS琼脂培养基:
这种培养基除含有基本的营养物质外,
还含有乳糖和中性红指示剂(遇酸变红,遇碱变黄)。
是否能够分解乳糖是鉴别肠道致病菌和非致病菌的重要依据之一。通常非致病菌能分解乳糖产酸产气,而致病菌则不能分解乳糖。
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观察大肠杆菌和伤寒杆菌在SS琼脂培养基上的生长现象:
大肠杆菌分解乳糖产酸产气,使指示剂变红,故菌落为粉红色。
伤寒杆菌不分解乳糖,则不变色,为橙黄色菌落。
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2、EMB(伊红-美蓝)琼脂平板培养基:
在无糖琼脂内加入乳糖,加热溶化,冷至50℃。加入经高压灭菌的伊红及美蓝溶液,摇匀后倾注平板。
现象:因大肠杆菌能分解乳糖,使指示剂变色,呈现紫黑色有金属光泽的菌落。而伤寒杆菌则不变色。
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3、双糖含铁培养基:
分上、下两层:
上层为固体斜面培养基:除基本成分外,另加有乳糖、酚红指示剂(遇碱变红,遇酸变黄)和硫酸亚铁。()
下层为半固体培养基,含葡萄糖和酚红指示剂。
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分别接种大肠和伤寒杆菌在双糖含铁培养基上,观察现象:
大肠杆菌:试管由红变黄,有气泡,有动力。
伤寒杆菌:上层仍为红色,下层由红变黄,有黑色沉淀,有动力。
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硫化氢试验:
有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸等),产生硫化氢气体,可与培养基中的硫酸亚铁生成黑色沉淀,为硫化氢试验阳性。
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二、吲哚试验(靛基质试验)
原理:有些细菌能分解培养基中的色氨酸生成吲哚(无色),向其中加入吲哚指示剂(对二***氨基苯甲醛),可与吲哚结合生成玫瑰吲哚而呈红色,为吲哚试验阳性。
蛋白胨水培养基:蛋白胨、蒸馏水、***化钠,。
大肠杆菌的吲哚试验阳性。
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三、五糖发酵管试验
成分:蛋白胨、水、***化钠、酚红指示剂和各种糖类
五糖:葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖
现象:大肠杆菌各管均呈黄色,有气泡
伤寒杆菌的2、5管不变色
可用于致病与非致病菌的鉴别
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