文档介绍：实验八实验八肠道杆菌肠道杆菌??实验目的: 实验目的: ??观察大肠杆菌,伤寒杆菌在观察大肠杆菌,伤寒杆菌在 SS SS 琼脂平板和琼脂平板和在在 EMB EMB 琼脂平板生长状态。琼脂平板生长状态。??观察大肠杆菌,伤寒杆菌在双糖含铁斜面观察大肠杆菌,伤寒杆菌在双糖含铁斜面的菌落特点。的菌落特点。??五糖发酵试验。五糖发酵试验。??吲哚试验。吲哚试验。??一、肠道鉴别培养基一、肠道鉴别培养基??1 1、、 SS SS 琼脂培养基: 琼脂培养基: ??这种培养基除含有基本的营养物质外, 这种培养基除含有基本的营养物质外, ??还含有还含有乳糖乳糖和和中性红指示剂中性红指示剂( (遇酸变红,遇遇酸变红,遇碱变黄碱变黄) )。。??是否能够分解乳糖是鉴别肠道致病菌和非是否能够分解乳糖是鉴别肠道致病菌和非致病菌的重要依据之一。通常非致病菌能致病菌的重要依据之一。通常非致病菌能分解乳糖产酸产气,而致病菌则不能分解分解乳糖产酸产气,而致病菌则不能分解乳糖。乳糖。??观察大肠杆菌和伤寒杆菌在观察大肠杆菌和伤寒杆菌在 SS SS 琼脂培养基琼脂培养基上的生长现象: 上的生长现象: ??大肠杆菌分解乳糖产酸产气,使指示剂变大肠杆菌分解乳糖产酸产气,使指示剂变红,故菌落为粉红色。红,故菌落为粉红色。??伤寒杆菌不分解乳糖,则不变色,为橙黄伤寒杆菌不分解乳糖,则不变色,为橙黄色菌落。色菌落。??2 2、、 EMB( EMB( 伊红伊红- -美蓝美蓝) )琼脂平板培养基: 琼脂平板培养基: ??在无糖琼脂内加入乳糖,加热溶化,冷至在无糖琼脂内加入乳糖,加热溶化,冷至 50 50 ℃℃。加入经高压灭菌的伊红及美蓝溶液, 。加入经高压灭菌的伊红及美蓝溶液, 摇匀后倾注平板。摇匀后倾注平板。??现象:因大肠杆菌能分解乳糖,使指示剂现象:因大肠杆菌能分解乳糖,使指示剂变色,呈现紫黑色有金属光泽的菌落。而变色,呈现紫黑色有金属光泽的菌落。而伤寒杆菌则不变色。伤寒杆菌则不变色。??3 3、双糖含铁培养基: 、双糖含铁培养基: ??分上、下两层: 分上、下两层: ??上层为固体斜面培养基:除基本成分外, 上层为固体斜面培养基:除基本成分外, 另加有另加有乳糖乳糖、、酚红酚红指示剂指示剂( (遇碱变红,遇酸遇碱变红,遇酸变黄变黄) )和和硫酸亚铁硫酸亚铁。。(PH (PH 值值 ) ) ??下层为半固体培养基,含下层为半固体培养基,含葡萄糖葡萄糖和和酚红酚红指指示剂。示剂。??分别接种大肠和伤寒杆菌在双糖含铁培养分别接种大肠和伤寒杆菌在双糖含铁培养基上,观察现象: 基上,观察现象: ??大肠杆菌:试管由红变黄,有气泡,有动大肠杆菌:试管由红变黄,有气泡,有动力。力。??伤寒杆菌:上层仍为红色,下层由红变黄, 伤寒杆菌:上层仍为红色,下层由红变黄, 有有黑色沉淀黑色沉淀,有动力。,有动力。??硫化氢试验: 硫化氢试验: ??有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸( (胱胱氨酸、半胱氨酸等氨酸、半胱氨酸等) ),产生硫