文档介绍：高通量筛选方法与应用
Contents
高通量筛选技术
高通量筛选应用
高通量筛选
高通量筛选的定义
高通量筛选系统的组成
生物芯片
分子阵列技术
荧光检测技术
双杂交系统
噬菌体展示系统
药物筛选
蛋白质定向进化
其他应用
展望
1、高通量筛选简介
高通量筛选(High Throughput Screening, HTS)是指以分子和/或细胞水平的实验方法为基础,采用不同密度的微孔平板作为实验载体和自动化工具操作实验步骤,通过快速灵敏的检测装置在同一时间内对海量样品进行生物活性测定、采集实验数据和数字化分析处理,并以相应的信息管理软件支持整个系统的正常运转的技术体系。
图 1 高通量筛选示意图
Experimental problem
Generation of the work list
Preparation of samples
Fabrication of the specimen
Incubation
Detection
Analysis and reporing
Loading of the bio-chips
Preparation of data and dissemination of information
Gathering and processing of information
Inspection by means of software
图 2 高通量筛选系统15年的发展情况
高通量筛选特点
每一个检测仅需微量的样品
高通量筛选具有较高的特异性
由同一化合物用不同模型筛选的活性数据,以及由对同一模型不同化合物的活性数据归纳出的结构活性关系,可以为药物发现等过程提供极为有价值的信息
每天可以对数十甚至数百块微孔板进行分析,对数千乃至数万的样品进行检测
高通量筛选系统组成
1
高容量的样品库、化合物系统
2
自动化的操作系统
3
高灵敏度的筛选检测系统
4
高效率的数据处理系统
5
合适的筛选模型
高通量筛选检测方法
图 3 体外生化检测方法
体外生化检测
均相检测
异相检测
放射性检测
非放射性检测
SPA微粒
SPA微孔板
显色反应检测
吸收光检测
荧光检测
微粒方法检测
放射性检测
非放射性检测
过滤方法检测
吸收方法检测
沉淀方法检测
放射免疫
ELISA
检测
高通量检测方法
细胞水平检测
均相检测
异相检测
微生物检测
哺乳动物细胞检测
放射性检测
非放射性
功能检测
报告基因检测
混合检测
放射性检测
非放射性检测
过滤方法检测
细胞毒性和细胞增殖检测
放射免疫
ELISA
检测
存活检测
生长/生长抑制检测
双杂交检测
报告基因检测
图 4 细胞水平检测
2、高通量筛选常用技术
筛选技术
生物芯片
分子阵列技术
荧光检测技术
双杂交系统
噬菌体展示
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