文档介绍：姓名: 陈佳佳
学号: 3080402127
班级: 生工081班
专业: 生物工程
指导教师: 葛飞
2011年12月29日
枯草芽孢杆菌通风发酵实验
一、实验目的
,了解通风搅拌的发酵过程
二、实验原料
***化钠100g、葡萄糖150g、蛋白胨100g、酵母浸膏150g、水、枯草芽孢杆菌培养液、消泡剂
三、实验设备及仪器
30L通风搅拌发酵罐、pH计、分光光度计
四、实验原理
利用机械搅拌器的作用,使空气和发酵液充分混合促使氧在发酵液中溶解,以保证供给微生物生长繁殖、发酵所需要的氧气。
五、实验步骤
将枯草芽孢杆菌接种在三角瓶内的培养基中,34℃下振荡培养24h。
第一步:打开空气压缩机和蒸汽发生器;
第二步:关闭所有进入夹套、罐体阀门;
第三步:关闭空气管道,蒸汽管道通气,排掉管道内污水及冷凝水;
第四步:开启空气管道与蒸汽管道连接阀门,关闭空气管道进气阀门,进行空气管道灭菌若干时间;
第五步:灭菌结束后,关闭进蒸汽阀门,开启进空气阀门,排除管道内冷凝水。
第一步:向罐体内加入水至15L左右;
第二步:关闭夹套冷凝水进水口,排出夹套内的水,向夹套通入蒸汽,同时打开搅拌器,直至温度升至100℃;
第三步:当温度升至100℃时,关闭夹套进蒸汽阀门,关闭搅拌器,以U字形从右至左、由远及近依次打开罐体进蒸汽阀门,直至温度升至121℃;
第四步:保持121—125℃半小时;
第五步:打开夹套内冷却水,冷却发酵罐,排出罐内水分,空消结束。
第一步:配料后将料液加入到发酵罐内,并通入自来水至13L,实消结束变为15L;
第二步至第四步同空消的第二步至第四步;
第五步:打开夹套内冷却水,冷却发酵液,最终保持在34度左右,同时向罐内通入无菌空气,;
第一步:待温度、空气流速及罐内压力调节结束后,准备接种;
第二步:接种环内棉花用酒精润湿,套入进料口,点燃,将枯草芽孢杆菌倒入发酵罐内;
第三步:打开搅拌器,进行搅拌;
每隔3h取一次样品,并且测定其pH和生物量(OD值)。
六、实验数据记录
时间
组别
0
3
6
9
12
15
18
21
24
第五组
pH