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选3专题2221动物细胞培养和核移植技术.ppt

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选3专题2221动物细胞培养和核移植技术.ppt

上传人:海洋里徜徉知识 2025/5/28 文件大小:886 KB

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动物细胞融合
单克隆抗体技术
核移植技术
动物细胞工程常用技术
其它动物细胞工程的基础
一、动物细胞培养
就是从动物机体中取出相关组织,将它分散成单细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
1、概念:

2、原理:细胞增殖
如何进行细胞培养?请阅读课本P44—46,思考下列问题
1、无菌、无毒的环境
(培养液和用具的无菌处理,添加一定量的抗生素,定期更换培养液)
2、营养
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、微量元素等)
3、温度和PH
+,~
4、气体环境
O2和CO2(95%空气和5% CO2 )
4、动物细胞培养条件
离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力
不能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶
氧气是细胞代谢必须的; CO2维持培养液的PH。
1. 细胞贴壁:
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
2. 接触抑制:
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。肿瘤细胞失去接触抑制。
原代培养细胞特点:
贴壁生长、接触抑制:
原代培养:人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。
传代培养: 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理, 然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。(分瓶培养的过程)
传代10代以内,细胞正常生长,保持正常二倍体核型。
传代10-50代左右,细胞增殖会逐渐缓慢,以至于完全停止,部分细胞核型可能发生变化。
继续传代培养少部分细胞克服细胞寿命的自然极限,获得不死性,细胞突变,遗传物质已经改变,等同于癌细胞。
细胞株:
从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞,传代培养的细胞能传到10-50代,其遗传物质没有发生变化。
细胞系:
一般传代50代后有部分细胞遗传物质发生了变化,带有癌变的特点,可能在培养条件下无限制的传代下去,这种传代细胞称为细胞系。
细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
胰蛋白酶
剪碎
单个细胞
加培养液
制成
细胞悬浮液
10代
细胞
部分细胞“癌变”,无限传代
动物细胞培养不能
最终培养成动物体
50代细胞
原代培养
传代培养
细胞贴壁
剥离、分瓶
细胞株
细胞
细胞系

胰蛋白酶
5、动物细胞培养技术的应用
(1)生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
(3)用于检测有毒物质
(2)为基因工程提供受体细胞
(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据
获得细胞
细胞的全能性
细胞或细胞产品
新的个体或细胞产品
培养结果
或细胞产品
快速繁殖、培育无病毒植株等
培养目的
葡萄糖、动物血清
蔗糖、植物激素
培养基特有成分
液体培养基
固体培养基
培养基性质
细胞增殖
原理
动物细胞培养
植物组织培养
比较项目
6、植物细胞和动物细胞培养的比较
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 --------------------(  )   
A.细胞系 B.细胞株
C.原代细胞 D.传代细胞
2、动物细胞工程技术的基础是 ------( )    

练一练