文档介绍：IGF-Ⅱ基因启动子***化状态与肝癌发生关系研究
南通大学附属医院临床医学研究中心
研究背景
肝细胞癌(HCC)是与慢性病毒感染密切相关
流行病调查,我国目前约9 300万乙肝病毒携带者,约4 000万丙型肝炎病毒感染者。
预后差,5年生存率约11﹪。
遗传学
基因突变
基因杂合丢失
微卫星不稳定
原癌基因激活抑癌基因失活
肝癌
表观遗传学
DNA***化
组蛋白修饰
染色体重塑
肝癌发病机制
DNA ***化原理
DNA***化主要发生在CpG二核苷序列的胞嘧啶上
胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)
IGF-Ⅱ是一种与肿瘤形成密切相关的促有丝分裂原,在细胞增殖、分化、糖代谢调节方面有重要作用。
IGF-Ⅱ在胎肝和新生儿肝脏中基因有大量表达,但出生后基因迅速降低直至关闭,肝细胞癌变时IGF2 Ⅱ呈胚胎性过量表达,并具有强烈的致有丝分裂剂作用,参与肿瘤细胞增生及分化。
IGF-Ⅱ基因启动子与基因表达的关系
E1
E2
E3
E4
E5
E6
E7
E8
E9
P1
P2
P3
P4
人
P2
IGF-Ⅱ信号途径与肝癌
IGF-Ⅱ
IRS
SHC
PI3K
Akt
Ras
Raf
MAPK
IGF-ⅠR
Proliferation Survival Metastasis
IGF-Ⅱ
IGF-Ⅱ
实验目的
本研究动态观察鼠肝细胞癌变过程中IGF-Ⅱ基因启动子***化状态改变及其与IGF-Ⅱ基因表达的关系;
同时分析人不同肝组织中IGF-Ⅱ基因启动子***化状态及与临床病理学特征之间的关系,探讨IGF-Ⅱ形成中的作用机制。
材料和方法
以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲雄性Sprague-Dawley(SD)鼠诱发肝细胞癌变,通过病理组织学方法(HE染色)观察肝细胞形态学动态变化;
以***化特异性聚合酶链反应(MSP)检测鼠IGF-Ⅱ基因P2***化状态;以酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测鼠外周血和肝组织IGF-Ⅱ基因的蛋白表达水平;
以MSP检测人类肝细胞癌、癌旁以及正常肝脏组织IGF-Ⅱ基因P3***化状态。