文档介绍：异***醚对血管性痴呆大鼠认知功能影响的实验研究
上海交通大学附属瑞金医院麻醉科200025
陶国荣薛庆生任瑜于布为
中文摘要
目的本实验旨在考察异***醚对血管性痴呆(VD)大鼠认知功能的影响,同时从海马α7 nAChR表达水平考察异***醚作用的可能机制。
方法永久结扎SD大鼠双侧颈总动脉1个月构建VD模型,并设对照(Sham)组。将VD组(38只)及Sham组(19只)大鼠分成6组,分别吸入异***醚或氧气。第1组:Sham+氧气组,n=10,每日吸入纯氧1小时,连续吸5天;第2组: Sham+异***醚组, n=9,每日吸入2%异***醚1小时,连续吸5天;第3组:VD+氧气组,n=9,每日吸入纯氧1小时,连续吸5天;第4组单次吸入异***醚组:VD+异***醚组,n=9,第5日吸入2%异***醚1小时;第5组每日吸入异***醚组: VD+异***醚组, n=10,%异***醚1小时,连续吸5天;第6组每日吸入高浓度异***醚组: VD+异***醚组, n=10,每日吸入2%异***醚1小时,连续吸5天。处理结束后再利用MORRIS水迷宫观察吸入异***醚对大鼠认知功能的影响;然后行常规病理检测观察吸入异***醚对海马区病理形态的影响,并用免疫组化、Western blot和real-time PCR检测海马区α7 nAChR的表达。
结果水迷宫实验发现异***醚抑制Sham组和VD组大鼠空间认知功能;常规病理(HE染色、焦蓝紫染色和快兰染色)显示2、3、4、5、6组大鼠海马区受损,其中4、5、6组损伤较重,表现为海马区神经细胞明显肿胀、出现核固缩、胶质细胞增生;第4、5、6组大鼠海马区α7nAChR的蛋白水平明显低于第1、2、3组;第4、5、6组大鼠海马区α7 nAChR的mRNA水平显著高于第1、3组。在所有6组中,第5组大鼠的认知功能及病理形态损伤最重,其α7nAChR的蛋白水平最低、mRNA水平最高。
结论异***醚吸入可加重VD大鼠认知功能的降低,该作用可能与异***醚抑制VD大鼠海马区α7 nAChR的表达有关,这种作用可能与异***醚的浓度及剂量有关,。
关键词术后认知功能障碍;血管性痴呆;异***醚;MORRIS水迷宫;神经元烟碱受体;免疫组化;实时定量PCR;蛋白质印迹
ABSTRACT
Objective
To investigate the effects of isoflurane on cognition of vascular dementia (VD) rats and the expression of α7nAChR in their hippocampus.
Methods
The VD model was established by the method of permanent occlusion of the mon carotid arteries (2VO) and set the sham group as control. After one month, the VD and the sham rats were divided into 6 groups by different concentrations of isoflurane and oxygen inhalation. Group 1 (n=10): Sham+oxygen, inhaled pure oxygen 1 h per day for 5 days; Group 2 (n=9): Sham+isoflurane, inhaled 2% isoflurane 1 h per day for 5 days; Group 3 (n=9): VD+oxygen, inhaled pure oxygen 1 h per day for 5 days; Group 4 (n=9): VD+ isoflurane, inhaled 2% isoflurane for 1 h only for one day; Group 5 (n=10): VD+ isoflurane, inhaled % isoflurane 1 h per day for 5 days; Group 6 (n=10): VD+ isoflurane, inhaled 2% isoflurane 1 h per day for 5 days. The influenced of isoflurane on the cognitive function of VD and sham rats were also evaluated by the MORRIS water maze test and pathomorphological examination, the