文档介绍：第8章肠杆菌科
肠杆菌科细菌是一大群生物学性状近似的革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群,少数为病原菌,具有重要致病意义。肠杆菌科细菌种类繁多,如埃希菌属、沙门菌属、耶尔森菌属、克雷伯菌属、变形杆菌属等。埃希菌属的血清型、肠毒素、志贺毒素和菌毛粘附素等毒力因子及致病机理极具代表性。
(Enterobacteriaceae)
第一节埃希菌属(Escherichia)
埃希菌属有5个种,其中最重要的是大肠埃希菌俗称大肠杆菌(),是最常见的临床分离菌。
一、形态及染色特性
革兰氏阴性小杆菌,无芽孢、兼性厌氧,散在或成对,周鞭毛,有菌毛。
二、培养特性
,光滑、湿润、半透明、灰白色菌落;
2. 麦康凯琼脂上形成红色菌落,伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽菌落;
;
:糖发酵试验(发酵乳糖)和IMViC(++--)试验。 H2S阴性。
麦康凯培养基
伊红美蓝琼脂(EMB)
三糖铁(TSI)琼脂试验
三糖铁琼脂(TSI)成分: 蛋白胨 牛肉膏 乳糖 蔗糖 葡萄糖 硫酸亚铁铵(含6个结晶水) 酚红 氯化钠 硫代硫酸钠 琼脂 蒸馏水
试验方法:以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物,穿刺接种并涂布于斜面,置36±1℃培养18~24h,观察结果。
TSI结果表示:
斜面/ 底层
产气;H2S
A=产酸(黄色),
K=产碱(红色),
+为阳性,
-为阴性,
()表示偶尔可见反应
志贺氏菌都能分解葡萄糖,产酸不产气,大多不发酵乳糖,不产生H2S。应该产生什么现象?
大肠杆菌,能分解葡萄糖产酸产气,大多数能分解乳糖,不产生H2S。应该是什么现象?
沙门氏菌,能分解葡萄糖,不发酵乳糖,大多数产生H2S,多数产气。
右图所示1、2、3、4,可能是大肠杆菌、沙门氏菌还是志贺氏菌?
IMViC试验
鉴别大肠杆菌与产气杆菌(水的细菌学检查)
I(吲哚试验):有些细菌含有色氨酸酶,能分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚。吲哚与对二甲基氨基苯甲醛结合,就会形成红色的玫瑰吲哚。
M(甲基红试验):某些细菌在糖代谢过程中,将培养基中糖先分解成丙酮酸,丙酮酸再分解成甲基、乙酸、乳酸等,因而使培养基变酸,用甲基红指示剂[(红色)—(黄色)],可使培养基由原来的桔黄色变为红色。
.(伏—普试验):某些细菌可利用葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进行缩合,脱羧变成乙酰甲基甲醇,此物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰。二乙酰与蛋白胨中的精氨酸作用,生成红色化合物。
C(柠檬酸盐试验):有些细菌能利用柠檬酸钠作为碳源,细菌在分解柠檬酸盐及培养基中的磷酸铵后,产碱性化合物,使培养基pH升高,在有1%溴麝香草酚蓝指示剂的情况下,培养基由绿色变为深蓝色。
三、抗原及血清型
(一)抗原
菌体抗原(O抗原):其成分为LPS的多糖侧链。173种,耐热,1个菌株仅含1种。
荚膜抗原(K抗原):其成分多数为多糖(K88、K99为蛋白质),80种, 1个菌株可含1-2种甚至无。根据对热的耐受程度不同分L、A和B型。
3. 鞭毛抗原(H抗原):其成分为蛋白质,不耐热,55种, 1个菌株仅含1种。
(二)血清型(抗原式)
表示方法:O:K:H, 如: O8:K23(L):H19
抗原构造复杂
鞭毛抗原(H)
菌体抗原(O)
K或Vi抗原