文档介绍：第十六章
高效液相色谱法与液相色谱仪
2018/5/13
内容:
一、高效液相色谱法的特点
二、流程及主要部件
三、影响分离的因素
四、高效液相色谱法的主要分离类型
2018/5/13
概述
高效液相色谱法(HPLC)是20世纪60年代末70年代初发展起来的一种新型分离分析技术,随着不断改进与发展,目前已成为应用极为广泛的化学分离分析的重要手段。
2018/5/13
一、液相色谱分离原理及分类
和气相色谱一样,液相色谱分离系统也由两相——固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相(或在惰性载体表面涂上一层液膜)、离子交换树脂或多孔性凝胶;流动相是各种溶剂。
2018/5/13
被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。
色谱分离的实质是样品分子(以下称溶质)与溶剂(即流动相或洗脱液)以及固定相分子间的作用,作用力的大小,决定色谱过程的保留行为。
2018/5/13
根据分离机制不同,液相色谱可分为:液固吸附色谱、液液分配色谱、化合键合色谱、离子交换色谱以及分子排阻色谱等类型。
2018/5/13
它是在经典液相色谱基础上,引入了气相色谱的理论,在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器,因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。为了更好地了解高效液相色谱法优越性,现从两方面进行比较:
2018/5/13
高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。高速是指在分析速度上比经典液相色谱法快数百倍。由于经典色谱是重力加料,流出速度极慢;而高效液相色谱配备了高压输液设备,流速最高可达 103cm·min-1。
高效液相色谱法与经典液相色谱法
2018/5/13
例如分离苯的羟基化合物,7个组分只需1min就可完成。
对氨基酸分离,用经典色谱法,柱长约170cm,,流动相速度为30cm3·h-1,需用20多小时才能分离出20种氨基酸;而用高效液相色谱法,只需lh之内即可完成。
又如用25cm× cm 的Lichrosorb-ODS(5μ)的柱,采用梯度洗脱,。
2018/5/13
(l)气相色谱法分析对象只限于分析气体和沸点较低的化合物,它们仅占有机物总数的20%。对于占有机物总数近80%的那些高沸点、热稳定性差、摩尔质量大的物质,目前主要采用高效液相色谱法进行分离和分析。
高效液相色谱法与气相色谱法
2018/5/13