文档介绍：兰州理工大学
硕士学位论文
结球白菜抗逆基因遗传转化方法的研究
姓名:杨慧莹
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:王鸣刚;刘凡
20100401
摘要以苏云金芽孢杆菌基因和蛋白酶抑制剂基因合成的双价抗虫基因口衅国是最重要的蔬菜。本研究以结球白菜龃亢锨妆炯捌湓咏缓蟠拇右段外植体,建立了高频离体不定芽再生体系。解析控制植物不定芽离体再生能力的遗传因素。采用农杆菌介导的离体转化技术,以甜菜碱合成酶基因和抗旱基因转录调控因子D康幕颍越崆虬撞恕氨本拧焙汀氨本┬号”为试材进行了离体转化实验的研究。采用农杆菌介导的原位转化技术,以苏云金芽孢杆菌趂蚝偷鞍酌敢种剂基因合成的双价抗虫基因仍ちΦ段D康幕颍越崆虬撞舜亢细叽越幌担—;开展了花序浸蘸法转基因的研究。刀为目的基因,进行了超声波十真空渗入联合处理法转化萌动种子的实验。收获自交的种子,在苗期进行转基因植株筛选,大包头、北京号、京夏王的后代未获的粜灾仓辏本┬号后代获得株粜灾仓辏醪浇峁砻鳎趂ち关键词:结球白菜,遗传分析,离体转化,⑷毡竞秃口基因已经整合到结球白菜的基因组中。硕士学位论文
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槭舡一姗会丁匏缩略语:┐际奖K姿崦Р菟岷成酶千碱基对卡那霉素萘乙酸聚合酶链式反应利福平十二烷基硫酸钠转移苯基噻二唑三羟甲基氨基甲烷转基因植株当代·疉猯—
作者签名:和黪作者签名:捅髭铆囱叭日期:加肜年么月兰州理工大学学位论文原创性声明学位论文版权使用授权书日期:加办年乡月已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。日期:琂年莎月孑日本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权兰州理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于⒈C芸冢年解密后适用本授权书。⒉槐C芡拧朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉啊导师签名:,
。通过转基因植物育种所改良的作物性状包括:抗病、抗旱等。导入与作物抗病相关的基因使作物能抵御或处缓病害和胁迫随着基因工程研究的不断深入,被分离出来的基因越来越多,这里列举从十字花科目詌自。的侵袭。蔬菜作物分离的基因或片段。硕十学位论文自表邮只ǹ剖卟俗魑锓掷氲幕蚧蚱
;逑档慕结球白菜又名大白菜阻畃分类上属于十字花科芸薹属芸近年来,研究者对白菜再生体系的影响因素开展了大量研究工作,通过调整培养基中激素种类及浓度、添加⒏谋淝碇浚褂檬实崩嘈偷淖橹乇鹗嵌允圆基因型的大量筛选,已在白菜类作物上建立了高频率不定芽再生体系。影响结球白菜不定芽再生的因素主要包括基因型、外植体类型、激素种类及浓度、耙蚁⑶碇薹种,主要分布在我国北方各省,是重要的传统蔬菜之一。结球白菜转化方法的研究
蓟蜃的芽再生能力最低,虲基因组的芽再生能力没有显著的差异。相同种内掣拷ǜ世对侍宸直鹩刖哂懈摺⒌脱吭偕芰Φ闹窒翟咏唬栽咏缓蟠难芸薹属不同种的植物,再生频率差异较大。为了更好地理解芽再生能力的基因型依赖性,许多研究组已经研究了芸薹属间和属内的芽再生能力。和发现油菜畁的芽再生能力比芜菁畆浚涮岢鯟基因组的基因可能影响芽再生能力。在芸薹属白菜.,⒑诮畁,⒏世.,龌局郑约八堑乃ǘ短逯纸娌珹、、和埃塞俄比亚芥.,嘧魑锷系难芯勘砻鳎哭分不同基因型的植物,其再生能力也表现出极大的差异。,能够实现不定芽再生的有郑谡庑┛稍偕钠分种校偕德士梢愿咧ィ虻椭座位控制芽再生。个基因控制再生能力的结果与在农作物如水稻【、大麦【和番取迷咏环ㄑ芯苛烁世独胩逖吭偕囊糯ǹ刂疲溲≡窳鯠鯢和ü越坏玫鲎越缓蟠6栽咏缓妥越缓蟠难吭偕芰辛朔用更为明显。芽再生能力的附加基因效果占了%,多芽再生的附加基因效果占了%。的种系,才能为遗传转化奠定很好的材料基础。浓度等几方面。.基因型的影晌弱,这表明抑制芽再生能