文档介绍：发根农杆菌介导的棉花遗传转化的研究硕士研究生:张程程指导教师:唐益雄研究员申请学位类别:理学硕士研究方向:植物基因工程培养单位:生物技术研究所研究生院文编号:专业:生物化学与分子生物学提交日期月●■
‘.篜篜,
猁姚\\彳徽和耢谚测獬甄去博导∥中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表博导影博导√讫奶饽发根农杆菌介导的棉花遗传转化的研究论文作者专业研究方向捧‘乎教师唐益雄培养单位芯克生物技术研究所位博导囚/‘肖兴国中国农业大学生物学院沈世华中博导函技术学院中国农业科学院生物张锐博导囱技术研究所齐俊生博导面硕导口,会姬己录厥孙国清讫鸨缡奔涞氐地点:作物所重大工程楼沂盜’’缎主‘均岍火烯硕导口/卅×贝:稳;平口型垡琿‘
研究生签名:多艮驵独创性声明关于论文使用授权的声明研究生签名:;;霍年乡月矽同印年/月加年‘月∞加本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。时间:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名::≯。
摘要棉花是我国重要的经济作物,但由于我国可耕地面积和水资源十分有限以及病虫害严重导致棉花生产安全压力很大。随着生物技术的迅猛发展,利用基因工程的手段将外源有益基因转入棉花的研究也越来越热。目前,转基因常用的方法是以根癌农杆菌介导棉花遗传转化,但该方法受到棉花基因型的限制、转化效率低和转化周期长等不利因素的影响从而制约了棉花转基因的发展本论文创新性地采用发根农杆菌遗传转化棉花,通过毛状根的诱导和培养,获得了再生植株,并获得转有三个B家蜃踊虻拿藁锤米右洞┛椎姆椒ǎ⒘宋蘧跫禄竦妹藁锤奶逑怠;竦玫拿藁锤谖藜素的培养基上表现出自发性生长和部分失去向地性等典型的毛状根性状。萌植煌姆⒏└司鶤虯分别侵染诱导三种陆地棉品种石远和柯字致哿司趾推分侄悦藁锤盏嫉挠跋臁>璻疉虻腜检测筛选阳性棉花毛状根,发现由野生型发根农杆菌介导柯字藁ㄆ分肿;拿锤致哿嗣藁锤盏嫉淖罴淹庵蔡宀课缓兔缌洹J笛榻峁砻天苗龄的棉花子叶最适合诱导毛状根。致哿擞盏济藁锤墓烫迮嘌谔荚础⑽藁魏陀谢煞稚系淖钣抛楹稀Q芯勘砻鳎以葡萄糖疞为碳源的培养基最优。醪浇⒘嗣藁锤偕仓甑呐嘌逑担竦昧株再生植株。庠吹娜鯩转录因子.,和转入发根农杆菌,诱导棉花获得了转基因棉花毛状根,并进行了基因组蚐的分子鉴定以及液体培养的生长曲线测定。研究发现在实验中所选取的棉花毛状根中,转基因毛状根要比未转入外源基因的毛状根生长旺盛。并结合以往研究结果,推测棉花毛状根具有生产棉酚的能力,并且棉酚的合成量与毛状根的生长能力成正比。关键词:发根农杆菌:棉花;遗传转化;毛状根:再生植株;B家蜃樱幻薹和运用。率最高。
.,,,甎瑀瓵琲,..琲,瑆,.,瑆琘。瓺甌—甀瓵甈甀瑆.:,。,緊/Ⅱ
棉花抗毒菌素一棉酚的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。发根农杆菌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⒏└司纳镅匦杂敕掷唷质粒的结构和功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...锤盏嫉姆肿踊啤毛状根诱导及培养方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.胢质粒转移外源基因的方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.锤脑鲋撑嘌.ü;仓甑募ā.⒏└司榈蓟蜃;挠跋煲蛩亍毛状根的特征及应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.┮涤τ谩研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第二章棉花毛状根的获得及再生植株体系的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..Ⅲ
.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯