文档介绍：实验二牡丹皮中丹皮酚的提取、分离与鉴定
实验目的
进一步掌握水蒸气蒸馏法。
掌握丹皮酚的定性鉴定方法。
实验原理
牡丹皮为毛茛科植物牡丹的干燥根皮,具有清热凉血、活血化瘀等功效:用于温血发斑、吐血呕血、夜热早凉、无汗骨蒸、经闭痛经、肿痛疮毒、跌打伤痛等。主要成分有丹皮酚、丹皮苷、芍药苷等,其中以丹皮酚为主要药效成分,具有降压、止血等多种药理作用。
丹皮酚具有挥发性,可随水蒸气蒸馏,又因在冷水中难溶,故放冷后析出结晶。
实验药材、仪器与试剂
实验药材牡丹皮100g。
仪器蒸馏瓶(2000ml)、回流冷流管、电炉。
试剂无水硫酸钠、NaCl、95%乙醇。
实验方法
提取分离
取市售牡丹皮100g,粉碎,置2000ml圆底烧瓶中,加450ml水,加10ml乙醇和40g***化钠,浸润1h,用水蒸气蒸馏(或共水蒸馏),收集蒸馏液约150ml,将蒸馏液放冷,有白色针状结晶析出,滤取结晶,干燥。
如结晶不纯,可加入95%乙醇至全部溶解(约为粗晶的15倍),抽滤,滤液中加入4倍量的蒸馏水,使溶液呈乳白色,静置后则有大量白色针状结晶析出。
若在制取过程中得不到白色结晶,只有油珠状物质沉出,可在蒸馏液中加入少量晶种,摩擦甁壁后,既有较大量的丹皮酚结晶析出。也可用***萃取蒸馏液几次,合并萃取液后,加无水硫酸钠脱水,回收***至少量,放置析晶,抽滤,结晶用少量水洗2~3次,置于干燥器中干燥。
鉴定
升华法
取产品粉末微量升华,升华物在显微镜下观察,可见长柱形或针状及羽状簇晶,于结晶上滴加三***化铁纯溶液,则结晶溶解而呈暗紫色,此为丹皮酚反应。
显色反应
三***化铁反应取产品结晶少许,滴加5%三***化铁醇溶液,呈暗紫色。
与浓***反应取产品结晶少许,滴加浓***数滴,呈红棕色。
(3) 薄层色谱鉴定
吸附剂:硅胶G-CMC-Na薄层板
样品:自制样品的乙醇液,丹皮酚对照品乙醇溶液。
展开剂:环己烷-乙酸乙酯(3:1)或环己烷-三***甲烷-无水乙醇(7:3:1)。
展开方式:上行展开,展距10cm。
显色:喷以盐酸酸化的5%三***化铁醇溶液,热风吹至斑点显色清晰。
实验结果记录:观察斑点颜色,记录图谱并计算Rf值。
注意事项
提取完毕后,需带油水完全分层,在接受挥发油时,应尽量避免带出水分。
用溴甲酚