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实验一生物化学实验基本知识与操作
一、课堂目标
,培养严谨的科学态度
,使试管内溶液混匀
,并练习使用。
二、生物化学实验基本知识
,然后认
真阅读实验指导,明确课时目标,了解实验原理、操作程序及实验中应注意的事项。
、仔细观察实验时要求学生严格按照实验指导和教师的
要求,一丝不苟地进行操作,仔细观察和分析实验中出现的各种现象,如实地将实验
结果、数据填写在记录本内。
,严格按操作规程正确使用每
种仪器。贵重仪器未经允许不得随意搬动,如不慎损坏,应及时报告指导老师。
,实验时保持室内安静。实验仪
器及用具必须洁净,实验试剂的排列应整齐有序。勿将试剂药品洒于桌面、地上或它
处。废物及强酸、强碱溶液应适当处理,以防堵塞和腐蚀水管。实验结束,做好清洁
工作,注意关断水,电源,关闭好门窗。
三、生物化学实验几项基本操作
(1)刻度吸管常见容量有l0ml、5ml、2m1、1ml、。通常将管身标
明的总容量分刻度为100等分。常选用与移取非整数量的试液,因厂家不同,有分刻度
到尖端和刻度不到尖端的两种。如刻度到管尖的,通常在管壁上标有“吹”字,放液
时必须在容液流完后吹出残留于吸管尖端的试液。使用前先认明。
(2)移液管吸管中间膨大,管壁只有一条总量标线,准确度较高,常用作移取
整数量的试液。常见规格有50ml、25m1、l0ml、5ml、2ml和lml等容量。操作时在放
出试液后,吸管尖端在容器内壁上仍要停留10~15秒钟。
以上两种吸管使用方法如下:用右手拇指和中指靠住吸管标线以上部分,将管尖
插入所要移取的试液液面下约lcm处。左手持洗耳球,对准吸管上口,慢慢吸取溶液
到刻度以上,立即以右手食指紧按吸管的上口。抽出吸管,用滤纸拭干管尖外壁,将
管尖靠在试剂瓶颈内壁,右手食指稍作放松,垂直缓慢地将多吸的液体放出至液面的
弯月面与标线相切时为止。立即用食指按紧,拿出吸管,垂直地移入准备好的容器中,
使管尖与容器内壁接触,让试液自然流出。
(3)微量定量移液管此管由塑料制成,因形如手枪故又称为枪式移液管。是较
为精密的取液仪器,规格有1000μl、500μl、250μl、200μl、100μl、50μl等,
最小可为5μl。有固定式和可调式2种类型。目前在临床生化检验中已广泛使用,用于血清、
标准液等微量液体的取样和加液。一管可用多次,每次只需更换塑料吸液嘴。
使用方法:正式使用之前,在不吸液状态下,连续按动多次,以保持管内空气工
作负压恒定。使用时先将吸液嘴套在移液管尖,轻轻转动,以保证密封。然后垂直地
握住移液管,将按钮按到第一停止点,并把吸液嘴浸入到液面下2~3mm,缓慢地放
松按钮,使之复位。1秒钟后取出移液管,即完成取样。最后将吸液嘴移至备好的容
器壁上,缓慢地把按钮按到第一停止点,待l秒钟后再完全按下按钮,排尽全部液
体。吸液嘴沿容器壁向上滑动取出,再放松按钮,使之复位,即完成一次操作过程。
使用另一种试液,应更换一支塑料吸液嘴。不使用时,应套上吸嘴,以保持管内清
洁。对于可调式微量移液管,使用时按钮上的标线必须对准所需容量的刻度线。
实验中,试管内每加入一种试剂参加反应,必须充分混匀。混匀的方法通常有以
下几种:
(1)少量液体的混匀可将试管轻轻振摇或摔动即可。
(2 ) 试管内液体较多时,可采用弹动混匀法,以一手持试管,另一手指拨动试管
底部,使管内溶液作旋转流动。
(3 )具塞试管内盛有多量液体时,可采用倒转混匀。
无论用哪一种方法混匀,都应防止试管内液体溅出或被污染。严禁用手指堵塞管口
的混匀动作。
选用普通台式电动离心机(1000—4000转/分)
(1 ) 取出离心机的全部套管,在无负荷条件下,开动离心机(3000转/分),检查
转动是否平稳。
(2 ) 检查套管与离心管大小是否相配,套管底是否铺好软垫,套管底部有无碎玻
片或漏孔(如有则取出或用蜡封孔)。
(3 ) 检查合格后,将盛有离心液的离心管2支分别放入离心套管中,然后在粗天
平上进行平衡,对较轻一侧可用滴管往离心管与外套管之间隙加水,直至两侧重量相
等为止。
(4 ) 将已平衡的