文档介绍：中国农业科学院
硕士学位论文评阅人、答辩委员会名单表
论文题目
动物分子免疫
论文作者高宇哲’ 专业预防兽医研究方向
及病原学
指导教师步志高培养单位(研究所) 哈尔滨兽医研究所
姓名职称硕(博) 单位专业签名. 导师‘
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答
辩研究硕导口
主赵启祖贝博导囹中国兽医药品监察所预防兽医学亳寰哆
席
陈启军教授博导团吉林大学预防兽医学谢锄争
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师东方教授 .东北农业大学预防兽医学彬
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曲连东员博导团哈尔滨兽医研究所预防兽医学 \印辑.
辩
研究硕导口
王云峰员博导团哈尔滨兽医研究所预防兽医学、4/量一
委
刘胜旺研究硕导口哈尔滨兽医研究所预防兽医学别j9彬
员博导团
冯力口哈尔滨兽医研究所预防兽医学渤
研究硕导口
贝博导团
会议记录(秘书) 孙元
论文答辩时间地点 201 1年6月10日于哈尔滨兽医研究所三楼学术报告厅
独创性声明
本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了
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关于论文使用授权的声明
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筛∈密的学位论文在解密后应遵守此协议)
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导师签名: 时间:矽,,年 /月‘I,臼
摘要
布氏杆菌病是五种世界范围内由细菌引起的传染性人兽共患疾病之一,布氏杆菌为革兰氏阴性,无芽孢,兼性厌氧的胞内寄生菌,分为7个种:Brucella melitensis(羊种),Brucella suis(猪种),Brucella abortus(牛种),Brucella ovis(绵羊种),Brucella canis(犬种),Brucella neotomae (沙田鼠种),以及Brucella maris(海洋种)。造成公共卫生危害的主要是羊种、牛种和猪种布氏杆菌,其中以羊种危害最为严重。
血清学监测对动物布氏杆菌病的防控和净化具有极为重要的意义。我国目前应用的布氏杆菌疫苗株包括羊种的M5-90,牛种的A19和猪种的S2。这三种疫苗都存在着疫苗免疫反应与自然感染无法区别的问题,对布病防控带来极大的困扰,迫切需要研发新型标记疫苗。
virBl2基因是布氏杆菌Ⅳ型分泌系统中的编码基因之一,而IV型分泌系统已被证明是布氏杆菌主要的毒力因子,有研究表明VirBl2蛋白位于布氏杆菌细胞表面,并可能在侵染宿主细胞时起重要作用。相关研究表明VirBl2蛋白能够诱导宿主产生相应抗体,是具有实际应用价值的布氏杆菌病血清学诊断靶抗原。,在我国得到广泛应用于牛羊的布氏杆菌病防控,其安全性和有效性已经为实践证明。,有望获得能够鉴别自然感染和疫苗免疫反应的标记疫苗。
为此,本研究首先利用大肠杆菌重组表达了ⅥrBl2蛋白,作为检测抗原,建立了检测相应抗原的间接ELISA方法。利用该方法检测了60份布氏杆菌阳性山羊血清及30份布氏杆菌阴性山羊血清,%,证明重组VirBl2蛋白对山羊布氏杆菌病的检测具有良好的特异性和敏感性。
进一步采用基因组同源重组方法,(-virBl2)。 BALB/e小鼠的毒力残留试验结果显示,-virBl2与M5-90免疫小鼠的脾脏重量与荷菌量的消减趋势基本吻合,-。BALB/c小鼠进行的攻毒保护实验结果显示,-,且与对照组差异显著。同时在一个月之内监测了M5--virBl2诱导羊产生的抗体水平,两者无明显差异。。