文档介绍：:高宇哲指师:步志高申请学位类别:农学硕士培养位:哈尔滨兽医研究所提交日期密级:论文编号:教单中国农业科学院研究生院月仁;.导。、、、.
/㈣嬲::.篜瓸—一
‘\.‘\彬渤亳寰哆别彬谢锄争\印辑.、恳硕士学位论文评阅人、‘’预防兽医步志高硕导口阅中吉林大学陈启军教授博导团·
一躲南旨吻陟日⋯鳓荡孚%独创性声明关于论文使用授权的声明晗缭拢痀日时间:加筛∈密的学位论文在解密后应遵守此协议本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。/月‘表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科导师签名:时间:矽,,年‘.
要摘基因是布氏杆菌Ⅳ型分泌系统中的编码基因之一,而型分泌系统已被证明是布氏布氏杆菌病是五种世界范围内由细菌引起的传染性人兽共患疾病之一,布氏杆菌为革兰氏阴性,无芽孢,兼性厌氧的胞内寄生菌,分为鲋郑築蛑,种珺牛种珺嘌蛑,犬种珺程锸笾,以及海洋种T斐晒ü参郎:Φ闹饕J茄蛑帧⑴V趾椭碇植际细菌,其中以羊种危害最为严重。血清学监测对动物布氏杆菌病的防控和净化具有极为重要的意义。我国目前应用的布氏杆菌疫苗株包括羊种的V值腁和猪种的。这三种疫苗都存在着疫苗免疫反应与自然感染无法区别的问题,对布病防控带来极大的困扰,迫切需要研发新型标记疫苗。杆菌主要的毒力因子,有研究表明蛋白位于布氏杆菌细胞表面,并可能在侵染宿主细胞时起重要作用。相关研究表明蛋白能够诱导宿主产生相应抗体,是具有实际应用价值的布氏杆菌病血清学诊断靶抗原。.疫苗株是将羊种疫苗株在鸡成纤维细胞上传代次之后而得到的毒力减弱的疫苗株,在我国得到广泛应用于牛羊的布氏杆菌病防控,其安全性和有效性已经为实践证明。,有望获得能够鉴别自然感染和疫苗免疫反应的标记疫苗。为此,本研究首先利用大肠杆菌重组表达了Ⅵ蛋白,作为检测抗原,建立了检测相应抗原的间接椒ā@酶梅椒ḿ觳饬莶际细司粜陨窖蜓G寮莶际细司跣山羊血清,〉募觳饩哂辛己玫奶异性和敏感性。进一步采用基因组同源重组方法,/∈蟮亩玖Σ辛羰匝榻峁允荆琈与庖咝∈蟮钠⒃嘀亓坑牒删康消减趋势基本吻合,,⒃嘀亓考昂删烤无显著差异,且与对照组差异显著。同时在一个月之内监测了约癕诱导羊产生的抗体水平,两者无明显差异。说明缺失株..。综上,本研究验证了蛋白可以作为布氏杆菌的一种血清学标记,并为布氏杆菌标记疫苗的构建提供了一个新的候选基因。关键词:基因,蛋白,布氏杆菌标记疫苗,布氏杆菌检测
甌,甌,,—,琻—.,/畁琣甿.,畇產瓹珹畁..—.Ⅵ—甌瓼—,..甿甊,、
录目第一章布氏杆菌的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.布氏杆菌概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯布氏杆菌的致病性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..吞噬细胞内布氏杆菌的特异小生境⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...≡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.活疫苗与灭活疫苗⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.堑ノ缓虳疫苗⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..全基因组范围内筛选、基因芯片与蛋白质组学⋯⋯⋯⋯⋯⋯.∈蟆本研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章实验材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.帧临床血清样