文档介绍：超氧化物歧化酶
简称:,能消除生物体在
新陈代谢过程中产
生的有害物质。
对人体不断地补充
SOD具有抗衰老的
特殊效果。
发展历史
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, , SOD)是1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶开始算起,人们对SOD的研究己有七十多年的历史。ord等重新发现这种蛋白,并且发现了它们的生物活性,弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质,所以正式将其命名为超氧化物歧化酶。
超氧化物歧化酶的来源
超氧化物歧化酶的来源有很多途径,可以根据当地的原料来源,成本需求,技术要求来选取不同的提取途径。
其中根据不同的分类有以下几个途径获取该酶。
1、植物提取
2、动物提取
3、微生物的生产发酵
4、人工合成
海藻植物中提取sod
海藻中提取含铁超氧化物歧化酶的方法,其特征是包括以下步骤:
1)取新鲜海藻以1∶2~3的重量体积比加入pH值7~8、浓度为50~100mmol/L、,将混和液进行超声破碎,破碎液离心,取上清;
2)将上清在50℃~55℃水浴中不断搅拌,进行热变性处理,去杂蛋白;
3)离心步骤2)所得上清液,加入(NH4)2SO4至饱和浓度40~50%,静置6小时以上,再离心、取上清,在上清液中加(NH4)2SO4至饱和浓度85%,静置6小时以上,离心、取沉淀;
4)取步骤3)所得沉淀,用pH值7~8,浓度为10mmol/L,,上SephadexG-25脱盐柱,用自动收集器收集酶活性部分;
5)将步骤4)收集的酶活性部分上阴离子DEAE-SepharoseFastFlow交换层析柱,~,浓度为10mmol/,盐梯度为0~,收集酶活性部分;
6)将步骤5)收集的酶活性部分经透析后上阳离子CM-SepharoseFastFlow交换层析柱,~,、,盐梯度为0~,流速控制在12ml/min,再收集酶活性部分;
7)将步骤6)收集的活性部分上分子筛SephadexG-100/SephadexG75柱,用pH值7~8,浓度为10mmol/,收集活性峰,活性峰用双蒸水透析,透析完全得样品溶液,用聚乙二醇20000浓缩,冻干,即得含铁超氧化物歧化酶。
大蒜中提取sod
采用热变性,聚乙二醇(PEG)6000沉淀作用和DEAE-纤维素柱层析3种方法对大蒜细胞溶质中的超氧化物歧化酶进行分离纯化。其方法如下:
大蒜→粉碎→水提→过滤→热变性→离心分离
→超滤→纳滤浓缩→真空冷冻干燥→大蒜SOD。
大蒜中sod的提取
SOD粗酶液的制备
方法为:称取大蒜500 g,捣碎成泥,按一定料液比加入蒸馏水,搅拌10 min。
静置60min后,用四层纱布过滤去杂,然后在60 ℃的恒温水浴锅中,热变性20 min。
4000 r/min离心10 min。
弃沉淀取上清液得实验用粗酶液。此时大蒜SOD
的酶比活力为16. 58 U /g,单位酶活为20. 54 U /mL。
大豆中sod的提取
大豆超氧化物歧化酶生产方法,是以大豆(豆类)为原料生产大豆超氧化物歧化酶(大豆SOD),其生产方法是将大豆依次经过:制作膨胀大豆、制取豆浆、调值处理、离心处理得上清液、加热过滤、超滤浓缩、干燥等工序。该方法有原料廉价充足、方法简便、成本较低、适于工厂化大量生产的特点。
一种大豆超氧化物歧化酶生产方法,其特征是----将大豆依次经过:制作膨胀大豆、制取豆浆、调值处理、离心处理得上清液、加热过滤、超滤浓缩、干燥的方法。
动物组织中提取sod
在动物中超氧化歧化酶(SOD)的提纯方法,将动物肝脏匀浆在二价铜盐的条件下分步加热和透析沉淀除去杂质,提取SOD;采用硫酸铵分步盐析,除去杂蛋百,收集含SOD的蛋白质,再经透析、浓缩、干燥,可获得比活力为2789单位/毫克的SOD.
其(SOD)提纯的方法,它以动物肝脏为原料,用氯化铜二次处理提取SOD,经离心沉淀、透析、分离去除杂蛋白,获得纯SOD。本发明的特征在于: a)~↓〔a〕~8MN二价铜盐匀浆,硫酸铵盐析。 b)~。 c)经透析后的SOD粗制液直接加热去除残留杂蛋白。