血小板计数法.ppt

文档介绍：血球计数板基本构造:
血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分割成两半,每个半边上各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数室。
计数室刻度有2种:
16中格x25小格
25中格x16小格
它们都是由400各小格组成。
每个大方格边长为1mm,则每个大方格面积为1mm2 。盖上盖玻片后,,所以每个计数室的体积为 = ,
每个大格有400个小格,所以每个小格的体积为
=1/4000mm3 =1/4000,000ml
血球计数板的分区与分格
例一
1大格=16中格
=16X25小格
=400小格
数25x4=100小格
例二
1大格=25中格
=25X16小格
=400小格
数16x5=80小格
材料与仪器
1、待测样品:酵母菌悬液
2、仪器:显微镜,血球计数板,接种环, 盖玻片等
方法与步骤
1、取洁净的血球计数板,在计数室上面盖上盖玻片。
2、取稀释到一定程度(5-10个酵母/小格)酵母菌液,从盖玻片边缘滴一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不能有气泡。先在低倍镜下找到小方格网后,再转换高倍镜观察并计数。
3、每个样品重复计数2-3次,计数时应不时调节焦距,才能观察到不同深度的菌体。
4、位于格线上的酵母菌一般只计此格的上方线及左方线的菌体。
5、计数方法:
样品中菌数/ml
=每小格平均菌数x4000,000x稀释倍数
本实验采用25x16规格,要求数80个小格。
设:每个中格的菌数为A,则
每个小格平均菌(A1+A2+A3+A4+A5)/80
样品中菌数/ml
= (A1+A2+A3+A4+A5)/80 x4000,000x稀释倍数