文档介绍：方法和措施
、药敏试纸片的制备: 
1. 取定性滤纸,用打孔机打成直径6毫米的圆形小纸片. 
2. 取圆纸片50片防入清洁干燥的青霉素空瓶中,-20分钟121℃高压消毒后, 
3. 放在37度恒温箱中数天,使其完全干燥.  
二、药敏片的制备(商品药): 
1. 按商品药的使用治疗量的比例配制药液. 
2. ,并翻动纸片,使各纸片充分浸透药液,,放37度温箱内过夜,干燥后即密盖。 
3. ,置阴暗干燥处存放,有效期3-6个月.  
三、培养基的制备: 
1. ,加蒸馏水至485ML于三角烧瓶。放置电子万用火炉上,不断搅拌至营养琼脂完全融化。 
2. -20分钟121℃高压消毒,同时把清洗洁净的培养皿一起高压消毒。 
3. 然后,每个培养皿中灌入18-20ML,室温凝固保鲜备用。  
四、药敏操作: 
1. 在净化工作台上,用动物肝脏或心脏的横断面置于培养基上均匀涂布。 2. 然后把七个不同的药敏片均匀分布在培养基上。 3. 置于恒温培养箱中37℃培养24H,然后观察结果。  
药物敏感判定标准: 
20以上极敏,15-20高敏,10-14中敏,10以下低敏,0不敏. 
培养基:应根据实验菌的营养需要进行配制,倾注平板时,厚度合适,约5-6毫米,不可太薄,一般90毫米直径的培养皿,倾注培养基18-20毫升. 
菌种的分离纯化
从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物,而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”,防止其他微生物的混入。

因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡,且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长,因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。

最简单的分离微生物的方法是平板划线法,其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。划线的方法很多,常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
大肠菌群的培养鉴定
大肠菌群能在乳糖胆盐液体培养液中生长,并且产气产酸,使培养液变色。还能在伊红美兰固体培养上生长,形成黑紫色的菌落,有的还有金属光泽。其他病原菌的菌落呈粉红色。再做镜检观察是无芽孢的革兰氏阴性杆菌(呈红色)。即可鉴定是有大肠菌群的菌存在。
菌种保藏
菌种保藏是将微生物的菌种经长时间的保存,不污染其它杂菌,及可保持其形态特征和生理性状,减少变异,防止衰老,以便于将来使用。
保藏菌种一般是选用它的休眠休,如孢子;芽孢等等,并且要创造一个低温;干燥;缺氧;避光和缺少营养的环境条件,以利于休眠体能长期地处于休眠状态。对于不产孢子的微生物,应使其新陈代谢处于最低状态,又不会死亡,从而达到长期保存的目的

1. 菌种:污水中的大肠菌群、酵母菌和霉菌