文档介绍：谈高效液相色谱法测定抗栓胶囊中士的宁含量
抗栓胶囊是由当归尾、丹参与马钱子( 制)等19 味中药组成的复方制剂。马钱子( 制) 为方中主药有大毒,与其功能主治密切相关,且含量测定方法成熟,简便准确,故以其主要成分士的宁为定量指标,笔者采用高效液相色谱法测定其含量,旨在修订士的宁含量的检测方法。
1 材料与方法
1. 1 仪器与试药岛津LC - 10ATVP 高效液相色谱仪; 色谱工作站( 大连化物所色谱中心) 。士的宁对照品( 中国药品生物制品检定所; 批号0705 -200005,供含量测定用) ,甲醇为优级纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯。对照品溶液的制备: 精密称取士的宁的对照品适量,加乙酸乙酯制成每1 ml含0. 02 mg 的溶液,即得。
1. 2 方法
1. 2. 1 系统适用性试验及色谱条件色谱柱: Luna5u silica 250 mm 4. 6 mm; 流动相为正己烷- 二氯甲烷- 甲醇- 浓氨试液( 42. 5∶ 42. 5∶ 4. 4∶ 0. 32) ; 流速为0. 6 ml /min; 检测波长254 nm; 理论塔板数以士的宁峰计算,应不低于3 000。
1. 2. 2 供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物约4 g,精密称定,置碘量瓶中,加石油醚( 30 ~ 60℃) 50 ml,超声处理20 min,滤过,弃去滤液,挥干,连同滤纸一同放入碘量瓶中,精密加氯仿50 ml 与浓氨试液2 ml,密塞,轻轻振摇,称定重量,放置24 h,再称定重量,用氯仿补足减失的重量,振摇,滤过,即得。
1. 2. 3 方法学考察
1. 2. 3. 1 专属性试验精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照液各10 μl,分别注入液相色谱仪,测得各液相色谱图。供试品色谱中,在与淫羊藿苷对照品色谱相应的位置上有相应的色谱峰,而阴性对照在与对照品相应的保留时间附近无干扰,表明该法专属性良好。
1. 2. 3. 2 标准曲线的制备精密称取士的宁对照品适量,加乙酸乙酯制成0. 021 24 mg /ml 的溶液。精密吸取该溶液3、5、7、10、12、14 μl,分别注入液相色谱仪,以峰面积为纵坐标,对照品进样量( μg) 为横坐标绘制标准曲线,得回归方程为: Y =6 641 255. 8X - 200 805,γ = 0. 254 88,线性范围为0. 063 7 ~ 0. 297 36 μg。
1. 2. 3. 3 稳定性试验取同一供试品溶液,分别在0、2、8、16 h 依正文收载方法测定,按士的宁酯峰面积计,RSD 为2. 40%,表明供试品溶液在16 h 内稳定性良好。
1. 2. 3. 4 重复性试验取样品6 份,按样品测定项下方法制备供试品溶液,测定,平均含量为0. 087mg /粒,RSD 为2. 95%,表明重复性良好。
1. 2. 3. 5 精密度试验取样品6 份,按样品测定项下方法制备供试品溶液,重复进样6 次,记录峰面积,结