文档介绍：高通量药物筛选模型* 本课题为国家自然科学基金资助项目(项目编号30171094和30271497)。联系人:杨洁,南京大学生命科学学院,医药生物技术国家重点实验室,南京210093,中国;电话:86-25-3594060,传真:86-25-3324605;Email:luckyjyj@。
姚佳杨建波杨洁*
(南京大学生命科学院生物化学系,医药生物技术国家实验室,南京210093)
摘要: 本文介绍了可用于药物筛选的三种新的快速高通量筛选方法,包括基于反酵母双杂交的筛选系统;细胞平台伤的高通量筛选系统以及动物水平的筛选系统。并对其应用原理,应用情况和有缺点进行了阐述。
关键词: 高通量筛选(HTS),酵母双杂交,靶点,受体
Abstract:
This article mainly deals with three new dominant plat forms of HTS(High-Throughput Screen) which are fairly useful in drug screen——the reverse yeast two hybrid system, the cell-based screen and the animal platform, including their principles, their appliance and their advantages together with disadvantages.
Key Words: High-Throughput Screen, yeast two-hybrid system, target, receptor
学科分类号:Q7
药物筛选模型研究经历了三个不同的发展阶段:最初意义上的筛选方法、分子生物学筛选方法和高通量筛选方法,而每一个阶段都源于一种新技术的诞生。最初的药物筛选是直接利用动物组织或天然产物进行的,并不涉及到疾病发生的分子机制。在这样粗略的筛选系统中只有有限的样品得到筛选,而且大多数样品只是基于疾病表征而非靶点的筛选。因此,药物的发现会带有偶然性。1980年以来,随着有机化学和分子生物学的发展,更加系统化的筛选方法应用到药物研究与开发中。一方面,有机化学的飞速发展为筛选提供了庞大的人工合成小分子库;另一方面,分子生物学为筛选提供了靶蛋白。通过比较正常人群与疾病患者间在机体组织细胞分子上的差异以及阐明模型组织中相应蛋白质的功能,从而正确地选择、描述并确认某些靶蛋白,有助于更加理性地进行药物筛选,不足的是上述过程往往费时耗财。而基因组学的发展对这个问题提供了很好的解决方法,基因组学能够更加有效地验证潜在的靶蛋白,并通过功能基因组研究能够快速有效地确认与特定疾病有关的靶蛋白
[ 1 ]。
传统意义上的药物筛选方法一般包括精确定义某些具有选择性的靶蛋白、确定其中某些靶蛋白的生物学性质以及体外药物筛选[ 2 ]。而基于化学基因组学的药物筛选则包括从基因角度广泛地确定靶蛋白,对其中的大部分靶蛋白进行高通量的化合物筛选,对其中有希望的化合物进行生物活性检测。使用该方法的优势在于能够提供更多的靶蛋白数据以利于进行庞大的化合物库的筛选,从而能够提高活性化合物的发现几率。
由于组合化学和化学基因组学的迅猛发展,为药物筛选提供了大量的