Leica TCS SP5激光共聚焦显微镜系统软件操作手册.doc

文档介绍：Leica TCS SP5激光共聚焦显微镜系统软件操作手册
打开软件后,默认在Acquire面板的acquisition中,acquisition mode为xyz,Format扫描像素为512x512,average line and frame average 为1。
根据需要选择扫描模式,常用的有以下几种:xyz 层面扫描;xyt 时间扫描;xyλ光谱扫描。
扫描像素一般选1024×1024
设置平均一般选择line average 2-3次
保存图像方法
注意:一般在扫描结束后统一保存,为免数据丢失,可以从获取第一张图片后就要开始保存,以后每获取一张图片保存一次。
保存Leica .lif 文件
进入Acquire 面板的Experiment 中,右键点击Experiment,从弹出菜单中选中“Save Experiment “Experiment” as…”,保存lif文件到自己的文件夹中并取名。
导出lif文件
右键点击Experiment,从弹出菜单中选中“Export Experiment as tiff”,选择目标文件夹,选中rawdata导出单通道图片。
如需导出overlay 图片,则再次右键点击Experiment,从弹出菜单中选中“Export Experiment as tiff”,选择目标文件夹,选中overlay 导出多通道合成图片。
获取单一荧光图像
1、在beam path setting 中的load/save single setting 中选择所标记荧光的光路设置方法。
2、点击live开始连续扫描,优化图像质量。
调节z position选择需扫描层面,调节gain和offset 使图像亮度和背景到达到合适的状态,Zoom调节电子放大倍率。
点击stop,停止扫描。
3、选择像素1024×1024
4、点击capture image获取图像。
5、保存图像。
二、获取多荧光图像

1、点击seq ,出现sequential scan面板。
2、在sequential scan面板中点击scan 1,在beam path setting 中选择所标记的一种荧光的光路设置方法。
点击live开始连续扫描,优化图像质量。
调节z position选择需扫描层面,调节gain和offset 使图像亮度和背景到达到合适的状态,Zoom调节电子放大倍率。
点击stop,停止扫描。
在sequential scan面板中点击“+”,点击scan 2,在beam path setting 中选择所标记的另一种荧光的光路设置方法,点击live开始连续扫描,优化图像质量。
标记了几种荧光就添加几种方法。
选择“between frames ”模式。
3、选择像素1024×1024,点击Start获取图像。
4、保存图像。
三、获取多层荧光图像
1、在beam path setting 中选择所标记荧光的光路设置方法。
2、打开Z-stack 面板。
3、点击li