文档介绍：M5 CTAB植物基因组DNA
快速提取试剂盒使用说明书
产品名称单位货号
M5 CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒 50T MF117-T
M5 CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒 100T MF117-01
【储存条件】
室温保存
【试剂盒组分】
MF117-T MF117-01
裂解液PL 40 ml 80 ml
结合液PQ 15 ml 30 ml (第一次使用前按说明加指定量的乙醇!)
抑制物去除液IR 25 ml 50 ml
漂洗液 WB 15 ml 25 ml (第一次使用前按说明加指定量的乙醇!)
洗脱缓冲液 EB 15 ml 15 ml
吸附柱AC 50个 100个
收集管(2ml) 50个 100个
1)裂解液PL、或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在55˚C水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。结合液PQ盐酸胍浓度高,加入乙醇后可能出现一些沉淀不影响使用,直接取上清用。
2)避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
【产品简介】
改进的经典CTAB植物DNA抽提液内(添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份)迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,***仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质(根据需要,上清中还加入异丙醇离心沉淀基因组DNA,进一步去除其它各种杂质),然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖、多酚和细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
【产品特点】
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3. 快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。
4. 数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度,OD260/~,长度可达30 kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
【实验前准备及注意事项】
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到65˚C备用。
3. 需要自备***仿或者***仿/异戊醇(体积比24:1混合)、无水乙醇和β-巯基乙醇。
4. 结合液PQ 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 不同来源的植物组织材料中提取DNA 的量会有差异,一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, , pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20˚C。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH ),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释