文档介绍：第一课
第一部分:实验课要求
第二部分:微量移液器的使用
第一部分分子生物学实验课要求
1,课前预习:预习实验原理、步骤,思考可能的实验结果;
2,不无故旷课,不迟到早退;
3,保持课堂安静;
4,中途不随意离开教室;
5,保管好各自实验器材,实验结束仔细检查,遗失要及时报告;
6,严格按照老师的要求完成实验;
7,认真完成实验报告;
8,成绩:40%平时成绩(预习,操作,实验报告等),30%操作考试,30%笔试。
第二部分微量移液器的使用
根据取用溶液体积选用适当量程的微量移液器
P20     2 ~ 20
P200    21 ~ 200
P1000   201 ~ 1,000
一个完整的移液过程包括:
容量设定
安装移液头
预洗移液头
吸液
排液
卸去移液头
每一个步骤都要遵循操作规范。
容量设定
从大值调整到小值时,刚好即可。
从小值调整到大值时,需要调超过三分之一圈后再返回,这是因为计数器里面有一定的空隙,需要弥补。
不要将按钮旋出量程,这将导致移液器损坏。
吸液头安装
正确的安装方法是:把白套筒顶端插入吸液头,在轻轻用力下压的同时,把移液器按逆时针方向旋转180度。
切记用力不能过猛,更不能采取剁吸液头的方法来进行安装,那样做会对移液器造成不必要的损伤。
预洗吸液头
安装了新的吸液头或增大了容量值以后,应把需要转移的液体吸取、排放两到三次。这样做是为了让吸液头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使移液过程具有重现性。
其次,在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。
卸掉吸液头
一般用力下按吸液头推出器即可卸掉吸液头。
如吸液头安装过紧,则可用手卸除。
将吸液头丢弃到合适的废物收集器中。
7. 如不使用,将移液器调到最大量程。
反向移液法
在转移高粘度液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量液体时,很容易导致体积误差较大。为了提高移液准确性,建议采取反向移液法。
按下按钮至第二停点,将吸液嘴没入液面下,轻缓松开按钮回原点。
将吸液头在容器壁上停靠一下,以去除多余液体。
将吸液头紧贴容器壁,轻按按钮至第一停点,排出液体。
继续按住按钮,将留在吸液嘴中未被转移的多余液体返回原来容器或随吸液头丢弃。