文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
应用实时定量RT-PCR监测慢性粒细胞白血病疗效
姓名:邢文
申请学位级别:硕士
专业:内科学(血液病)
指导教师:陈赛娟
20040501
应用实时定量监测慢性粒细胞白血病疗效中文摘要意义。针对慢性粒细胞白血病存在的两种转录本——和患者的狝转录本水平表示为:校正的狝拷贝数胞,且有较高的特异性。谟τ敏腔搴透扇潘鼗蛉馍减ゼ钪例在急变缓解后行骨髓移植,,维持在笥摇τ肎穆云诨颊撸谥瘟实时定量是一种快速、准确和高度灵敏的实验技术,对于检测微小残留病变、预测疾病的复发和判断疾病的疗效具有重要的临床,设计了两套引物和探针,分别构建、和曜计质粒,优化反应条件,并对这一方法的准确性、敏感性进行了检测。瓵拷贝数/奖词H缓螅τ谜庖环椒ḿ觳了例患者治疗前、后和例患者不同病期的转录本水平。结果显示,梅ǖ呐省⑴诓钜斓谋湟煜凳∮%,最低可检测到个拷贝数的质粒,该法可在稣O赴屑觳獾个白血病细疗的患者中,恢蔽衷诼云冢銬稳定在左右,不再继续下降。例患者在治疗过程中发生急变,其直鹕高达倍、逗丁颊咝幸旎蛟煅8上赴浦玻已存活暌陨稀F渲例在慢性期行外周血造血干细胞移植,移植个月后,其陆倍或鰈陨希年后均检测不到;个月后,其档倍或个以上,维持在左右,上海第二医科大学硕士论文
患者的矫飨愿哂诼云诨蚣铀倨诨颊叩腄水平。综上所微小残留病变疗效复发甚至有的检测不到。另外,应用实时定量—姆椒ㄖな担北淦述,实时定量际跏亲既房煽康模认赴糯Х治龊投ㄐ訮技术灵敏度高、能提供更多的信息,对于检测慢粒微小残留病变、判断慢粒的治疗效果具有重要的临床意义。关键词:慢性粒细胞白血病实时定量—上海第二医科大学硕士论文
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体——即由上的蛴上的蚍⑸孜唬因,在%慢粒患者中,该融合基因主要产生两种形式的转录本一一或/和,它们由蛏系牡磐庀宰佑階物有较高的酪氨酸激酶活性,在慢粒发病中起关键作用畸啊B0醇病的进展可分为三期:慢性期、加速期和急变期,慢性期一般在持续佳选择。以供体淋巴细胞输注为代表的免疫疗法,可以使相当一部分干细胞移植后复发的患者获得完全缓解““”颐挥谢埔┪锏南赴慢性粒细胞性白血病#琧是一种起源于多能造血干细胞的克隆性疾病“哂刑卣餍缘腜染色成的一截短的号染色体。U庵秩旧逡孜恍纬葿—诤匣基因上的第磐庀宰恿有纬伞,其翻译产物较正常的狝基因产旰螅唇爰铀倨诨蚣北淦诓。目前,慢粒的治疗主要分为干细胞移植、以干扰素为基础的治疗、供体淋巴细胞输注和以为代表的酪氨酸激酶抑制剂等疗法。以干扰素为基础的治疗并不能完全清除白血病克隆,不能治愈慢粒,但能延长大部分患者的生存期,提高患者的生活质量旧“⋯,在上个世纪九十年代,以其为基础的治疗,被认为是不能进行干细胞移植患者的最毒性作用。干细胞移植包括骨髓移植、外周血造血干细胞移植和脐带血移植,是目前惟一公认的“治愈”慢粒的方法。然而,从年进入临床以来,越来越多的证据表明,它很容易使患者获得细胞遗传学完全缓解,对于干扰素耐药的慢性期慢粒患者有极好疗效,,舌上海第二医科搜妒柯畚
研究者发现,在慢粒患者治疗过程中,尤其是造血干细胞移植后,许有效率达%以上“⋯。虽然其长期疗效还有待于进一步观察,但对于不宜行干细胞移植的患者,它是目前可单独应用的最好药物。然而,治疗慢粒急变患者的效果却并不理想,有效率仅为%~%,约%的患者在数周或数月内复发“⋯。许多因素影响干细胞移植的成功,包括患者年龄、疾病分期、诊断与移植的时间间隔等等。虽然在慢性期移植的患者,其晟媛士纱ァィ窃加速期和急变期移植的患者,其晟媛试蛞サ乃俾实菁酢!彬尽在干扰素治疗的患者中,也只有%~%的患者可获得细胞遗传学完全缓解‘“总之,慢粒的复发仍是许多患者和治疗医师所必须面临的棘手问题。微小残留病变,被公认为是白血病复发的根源,它是指细胞形态学和细胞遗传学检查所不能检测到的白血病细胞数量。“。目前,—是临床上最常用、最为敏感的检测慢粒微小残留病变的方法。然而,多细胞遗传学完全缓解的患者,虽然其—裕床⑽藜膊「捶迹象。埃簧踔劣醒芯空叻⑾郑谝徊糠终H酥幸材芗觳獾紹—融合基因啦。”U馑得鳎ㄐ訮在检测微小残留病变、预测慢粒复发方面有⋯定的局限性;慢粒患者要获得长期缓解或治愈,并非一定要彻底地清除白血病克隆。目前,细胞遗传学检查仍是诊断慢粒和随访患者疗效的金标准,然而,该法需要采用患者的骨髓血,实验操作过程费时、费力,需要有相当数量的中期分裂相细胞,且敏感性低。因此,许多研究者正致力于发展和应用更为快速、可靠的检测方法。实时定量际跤由美国公司推出,由于该技术实现从定性到上海第二医科大学硕士论文
其应用也越来越广泛。慢性粒细胞白血病的微小残留病