文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA防治肝纤维化研究
姓名:李光明
申请学位级别:博士
专业:内科学消化系疾病
指导教师:李定国
20050401
作者签名:盔盔学位论文作者签名:套力口§“亨学位论文独创性声明学位论文使用授权声明日期:却豢诅恚本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确说明并表示谢意。本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。日期:导师签臼期
:生塑翌三垦翌纠嫉骅匪懿┦垦芯可宦畚抗结缔组织生长因子小分子干扰乐胃蜗宋芯中文摘要背景:肝纤维化是各种慢性肝病进展至肝硬化的必经阶段,是一种复杂、目的:①研究在肝纤维化发生发展中,基因表达水平变化与肝纤方法:①以四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化作为实验模型,应可逆、进展性的病理生理过程,主要与肝星状细胞案髦执傧宋赴子密切相关,前尚无有效防治药物。因此,必须加强对防治肝纤维化新型药物腥净虻ㄖ倩持续存在,其后果是引起损伤局部结缔组织生长因子致罨⒑铣杉胺置谙赴饣过多。因此,在慢性损伤刺激难以维化病理分级和型胶原基因表达的关系;②针对大鼠设计、合成并筛选能高效沉默基因表达的小分子干扰:③研究聊珻源笫驢生物学特性的影响:④研究聊对大鼠肝纤维化的防治作用及机制;⑤综合分析作为抗肝纤维化治疗靶位的可行性,为研制与开发针对人靶位的高效、新型治疗性旧ǘ愿蜗宋胁±矸旨叮τ肦癢检测在诱导芎周的肝纤维化大鼠与正常大鼠肝组织中、癐型胶原基因表达水平变化;②应用杓迫砑D獯笫驝级结构,设计并合成针对及坏愕娜塑账H綡术恢只罨拇笫驢系钥瞻准白H痉翘匾靤的基础研究。肝纤维化难以防治的主要原因在于慢性肝损伤的病因鏗、、转化生长因子一把P“逶葱陨だв瘸中置冢完全去除的情况下,阻断在介导罨⒑铣杉胺置贓中起关键作用的细胞因子表达可能是防治肝纤维化的一种新策略。药物防治肝纤维化提供理论基础和实验依掘。用及二李光
结果:①皮下注射艽笫蟾巫橹饕3蔍级纤维化病理改变,注结论:①在肝纤维化发生发展中,基因表达水平变化与肝纤维化塑三医科大学级博研究生学位论文作为对照,应用和靶基因及蛋白表达的阻抑效率;③经门静脉表达的影响;④经门静脉皮下置管,建立伟邢蛐愿┩罚鼠肝组织基因表达的阻抑效率;⑤应用染色、、然虮泶锏挠跋欤孩抻τ萌远治鲆分析沉默对大鼠血清尿素氮⒓◆⑿脑嗝秆Ъ把39娴炔问±.±倍;②针对大鼠范围内呈时间依赖性降低:③芟灾碌鞔笫笤鶫培养激活中的基因表达;由此抑制原代甋蛋白表达及细胞增殖;显著下调活型胶原表达及减少培养上清液中颓敖涸屯该髦仕岷量,但对瓸蚐、表达影响不明显;④经门静脉注射能显著抑制S盏嫉拇笫蟾蜟虮泶锷系鳎孩輘沉默肝可程度及徒涸虮泶锼奖浠氏灾喙兀隝型胶原基因表达水平变无同源性的析訦胶原酶原位灌注消化芏忍荻壤胄姆掷氪笫笤鶫;应用免疫细胞化学染、ā头派涿庖哐Х椒ǚ治龀聊珻源笫罨⒃鲋场⒑⑸鋝对诱导的肝纤维化大组织化学染色、放射免疫学方法、及确治鰏沉默对大鼠肝纤维化组织学和血清学的影响及对肝组织一平滑肌肌动蛋白射艹蔍级纤维化病理改变;在断宋虸级纤维化肝组织中,和蛋白质及型胶原表达水平分别较正常对照上调其对靶基因的抑制效率,在,疞范围内里剂量依赖性增加,在—;但对大鼠肝基因表达及血清心肌酶谱及血常规等参数影响不明显。分色法、旧ā⒚庖的影响。化学合成的詓,化、..±、..±、繭..李光叫中文摘舞
关键词:;②针对大鼠具有很好的切割活性,最大基因沉默效率为%,有效抑制时问达虎聊珻上灾种拼笫驢活化、增殖、合成及分泌虎芫门静脉皮下置管是一种将邢蛐缘既敫卧嗟挠行Х椒ā"輘沉默肝对诱导的大鼠肝纤维化具有预防及治疗作用,其机制可能与抑制活化和奂癟—虮泶镉泄兀虎蕹醪街な礐赡苁欠乐胃蜗维化的一个有效靶位。化学合成的园衜细胞
賂.②③躎.⑤,琫瑆,海第二医科大学级博貉芯可宦垡,琲瑀琩甎琣.,瓹瑄.,琣李光琁英文摘要.
貶.②.⑧—躎.⑤,轙,—一琻,,上海第二医科大学级博貉芯可宦畚..—.甌/,,李光明英文摘要
珻賕瑀