文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌细胞的实验研究
姓名:赖轶权
申请学位级别:硕士
专业:外科学(心胸外科)
指导教师:徐志伟
20050401
作者签名:建丛溜谚学位论文作者签名:嘻受喜哭权日期:趁盟亟生自肌学位论文独创性声明学位论文使用授权声明口广,、.本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确说明并表示谢意。本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。导师签名:日期:
骨髓问充质干细胞体外诱导分化为心肌细胞的实验研究中文详细摘要本研究拟探讨体外分离、培养骨髓间充质干细胞姆椒ǎ⒐鄄炱渖镅匦裕欢苑掷肱嘌墓撬鐼刑逋庥盏迹使其分化为心肌细胞并予以鉴定,同时对在不同时期进行诱导的心肌细胞的转目的:建立一种体外分离纯化、培养扩增大鼠骨髓的方法:初步探讨骨髓定向诱导分化为心肌细胞的潜能和最佳条件,为骨髓在心脏组方法:①大鼠骨髓的提取、分离与培养扩增:选用浣】敌坌大鼠逯卦~,按常规操作提取骨髓液,两次离心,沉淀用重悬制成细胞悬液,用含%胎牛血清、痬嗝顾亍痬疵素的培养基进行接种、原代培养。使用ヒ鹊鞍酌赶赴反复传代扩增,同时倒置相差显微镜下逐日观察细胞生长状况,并描绘骨髓生长曲线。②骨髓诱导分化与鉴定:提取大鼠骨髓液,分离培养胞苷盏即∈保兄购蟪9媾嘌怪孟差显微镜下逐日观察细胞诱导前后其形态变化,再培养芎缶庖呦赴染色检测肌钙蛋白⒘拥鞍滓徒岬鞍椎谋泶铩3醪焦浪愀髌谛募∠赴结果:①属骨筒中的单个核细胞,台盼蓝染色细胞活力达%~%。离纯化骨髓,对细胞活性影响小,体外培养实验中发现骨髓的生物学特性稳定,是一种较理想的分离纯化骨髓的方法。、、、的细胞生长曲线基本相同,随着传代次数的增加,其生长增殖能力逐步减慢,到、后细胞渐趋老化。传代细胞的增殖速度比原代细胞要快,适应性强。体外培养条件下骨髓具有许多成纤维细胞的生长特性。②诱导前骨髓的形态表现为较典型的成纤维细胞样,骨髓经盏己罂杉糠窒化率进行比较,探讨其诱导分化的规律、特点和最佳条件。织工程中的应用奠定理论基础。传代,标记为敝撂谙赴咏诤鲜保馗瓷鲜霾僮鳎骨髓,分别选择处于不同起始代数的骨髓用坏的转化率。通过贴壁培养法和多次传代消化控制相结合的方法,能快速、简便、有效地分上海第二医科大学碾圭论文中文摘要
胞形态明显变化,变长变大,呈椭圆形或梭形或扁平多角形或不规则形,培养胞之间出现连接,排列方向渐趋一致,天后随着换液,细胞数量有所减少,结论:通过贴壁培养法和多次传代消化控制相结合的方法,能快速、简便、有效地分离纯化骨髓,且随着传代次数的增加,其生长增殖能力逐渐降低:骨髓在体外能诱导分化为心肌细胞,心肌细胞转化率随着传代次数的增关键词:骨髓间充质干细胞心肌细胞坏0沼盏挤只芎筇寤锨案螅蟛糠直涑沙に笮危旌竽诓肯赴浜土俳湎细胞有粗大突起伸出,形成肌管样结构,彼此相互连接,到了天后细胞形态和数量渐趋稳定,无明显分化,诱导后常规培养期间细胞仍保持一定的分裂增殖能力。免疫细胞化学染色显示诱导后部分骨髓「频鞍譚、连接蛋白一和结蛋白有阳性表达。根据肌钙蛋白粜员泶锇俜致剩赏撇馐笛樽橹各个小组、、的心肌细胞转化率依次约为%、%、ィ宜孀糯代次数的增加,其向心肌细胞的转化率逐渐降低。加而逐渐降低,且以第二代细胞进行诱导分化较合适。上海第二医科大学碗士论文中文摘要
.鳖丝兰堡垡丝苎一———二茎型堕曼孩貰贏,,瓵瑃籄瓵/;篢,加珻疌瑃琲瑆琫,琣甀琲產籘,,,
.:①赥孩躎.②猘琭猯疨%.疌%,%,琁瑃甌猯上海第二医科大学硕士论文英文摘要,,,,.—,,,.琫,吕肖.
篶一上海第二医科大学礤士论文英文摘要簃;
前言婴儿死亡的最主要原因之~。据统计⋯∈质跣枰P薷床料。目前常用的材料主要有膨体聚四氟乙烯⒌勇⒆蕴寤异体心包或血管等,这些材料都具有缺乏收缩性和生长潜能等许多不利特点“’⋯。缺乏理想的修复材料是目前影响先心病外科治疗效果的难题。利用骨髓间工程学技术,在体外构建组织工程化心肌组织,为心脏外科手术治疗心脏病,提供了一种全新的思路和治疗策略。骨髓中除含有造血干细胞外,还含有骨髓髑。骨髓是中胚层来源的具有自我更新、分化增殖和多向分化潜能的干细胞,主要存在于全身结缔组织和器官间质中,以骨髓和脐血中含量最