文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
利用生物反应器构建组织工程化肌腱的实验研究
姓名:魏娴
申请学位级别:博士
专业:外科学(整形外科)
指导教师:曹谊林
20050501
◎上海第二医科大学博士学位毕业论文—痵
减⋯名:枷Ⅻ;型堕:兰型耳期:三螅骸甏发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出熏要贡献的个人和集体,均已在本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经文中作了明确说明并表示谢意。本入完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。作者签名:学位论文作者签名:日期
利用生物反应器构建组织工程化肌腱的实验研究各种原因膊』蛲馍说造成的肌腱缺损或损伤较为常见,可以引起肢体浅S糜诩‰熳橹こ痰闹Ъ懿牧希哂辛己玫纳锵嗳菪裕墙正常情况下,肌腱的发生和形成始终处于力学环境中。人们越来越意识到生物力学因素对肌腱构建的影响。研究证实,生物力学刺激可以明显改善构建组织的结构和力学特性,并且提示,与持续性外力相比,周期性外力可能更接近生理体压缩的原理,自行设计了能够按一定频率、幅度和时程对细胞一材料复合物施网、线等产品,并通过对生物相容性和机械强度等指标的检测,确定其是否适应环境。如何应用生物反应器模拟体内环境,是重要的研究方向。本实验室根据气功能障碍,甚至残废。肌腱的自我修复能力有限,目前治疗仍以肌腱移植和使用组织工程技术有望提供更为理想的治疗手段。肌腱组织工程方面的研究已经在以上工作的基础上,我们利用鸡肌腱细胞年Ъ茉诜从ζ髦泄菇ḿ中文摘要取得了很大进展,但是如何扩大种子细胞来源、开发合适的支架材料、。解速度快、抗拉强度差。为此,我们和东华大学纺织系合作开发了嘀加周期性轴向牵拉刺激的生物反应器。腱,比较周期性张力和无张力状态对体外构建的影响。上海第二医科大学博士学位毕业论文生物代用品为主,由于存在供体有限、供区缺损、免疫排斥、继发感染等问题,均未达到满意的效果。肌腱构建的要求。
方法:设计包括细胞培养室、动力系统、和控制系统的反应器,并在使用与动力系统和测量系统相连。当动力系统动作时,可带动连杆机构动作并对夹紧的细胞~材料复合物进行牵拉。控制系统为肌腱生物反应中完善该体系,依次解决污染、材料固定、软件设计、培养室尺寸等前逯鼙哂的活动度,内部的螺杆、压板设计便于细胞一材料复合物的固定。通过连杆机构,细胞培养室第一部分聚羟基乙酸编织线在肌腱组织工程中的适用研究方法:以两种来源的嘀宋J笛椴牧希琍无纺纤维作为对照材料,制成相同重量和长度的支架材料,接种相同数量的第二代鸡肌腱细胞,体外培养两周、反应器中培养两周后取材。光镜下动态观察结合鼙瓯咀橹Ъ觳椋卸舷赴氩牧系纳锵嗳菪裕⒍灾Ъ懿结果:实验材料荷兰,普拉克公司硐殖鲎罡叩幕登慷龋‰煜赴维基本保持连续状态。实验材料南通,和利康公司登慷壬材料拦珹机械强度最差,但是细胞与材料结合良结果:细胞培养室是采用有机材料加工制成的透明装置,外围尺寸为本文分分料进行力学测试,比较材料的机械强度。与材料结合紧密,基质分泌旺盛,芎蟪醪叫纬杉‰熳橹琍纤可,但是接种肌腱细胞后,细胞活力差,芎笞橹翁患选6哉第二部分反应器的设计与优化器提供功能控制及动力来源。应用反应器构建的肌腱外观良好,摹质上海第二医科大学博士学位毕业论文好,芎笠渤醪叫纬杉‰熳橹琍纤维基本断裂。问题。分泌旺盛,可以见到平行排列的细胞和胶原纤维。
⑧⒆橹墒恰ǜ龈丛拥墓蹋芏嘀忠蛩赜跋臁2捎媚壳暗呐嘌逑担成、,比较周期性张力刺激和静止培养对结果:起初,随培养时间延长,新生肌腱的质地、色泽、组织学、生化组发现,以上指标反而更差。周期性张力刺激组在各时间点的各项观察⒉捎煤衫计绽斯驹峡7⒌腜编织材料具有良好的生物相容性和综上可见,本实验为后续研究奠定了技术基础,同时也为相关生物力学研究利用生物反应器构建肌腱方法:将宋荷兰,普拉克公司瞥上嗤亓康谋∑又窒嗤数目的鸡肌腱细胞,两周后卷成圆柱状,外裹祝潭ㄔ谏定后堋周和周取材,进行大体、组织学、超微结构、生化组第三部分反应器中,部分接受周期性张力刺激,部分保持静止状态。分别于固构建肌腱质量的影响。成、机械强度和胶原表达均逐渐接近正常肌腱。但是体外培养时据此得出以下结论:机械强度,是肌腱构建的良好选择。⒘ρЩ肪扯怨菇ḿ‰煊兄匾S跋臁@梦颐亲孕锌7⒌姆从ζ骺梢怨菇出结