文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
少突胶质细胞分化相关基因的筛选及PDGF在神经干细胞分化为
少突胶质细胞中的作用
姓名:胡建国
申请学位级别:博士
专业:神经生物学
指导教师:徐晓明
20050501
少突胰质■胞分化相关基因的筛选及在神旺干■胞分化为少突胶质■胞中的作用神经生物学实验室上海第二医科夫学级博士研究生学位论文基础医学院专业神经生物学神经细胞分化及其机制徐晓明教授本课题系上海市科技发展基全院所研究方向研究生导师胡建国国家重点基础研究发裴计划资助项目.
一摧作者签名:兰跫堡日期;塑:圭:日期:堂§垫卤学位论文独创性声明学位论文使用授权声明本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确说明并表示谢意。本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向嗣家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学梗凰书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。。学位论文作者签名:
.海阂弧!!!!!兰:生±衍涯巡堡主牙迹海阂唬少突胶质细胞分化相关基因的筛选及在神经干细胞分化为少突胶质细胞中的作用中文摘要博士研究生:胡建国师:。在胚胎发育中,缮窬苣诘纳窬上皮细胞窬上赴琋经脊索和/或板层产生的因子诱导而来。近年研究认为两个新的基因蚾是决定向少突胶质细胞分化的和能够诱导多潜能的成年和胚胎分化为少突胶质细胞发育的最初阶段称为少突胶质细胞前体,表达,蚉Ⅱ等特异性标志。在体外无或低血清嘌跫拢证明,生长因子和联合应用可使持续自我更新而抑制分化,这种联合效应也可被大鼠神经母细胞瘤细胞株制备的条件培养基化为系,但是其诱导机制是什么覰絆只讨蟹⑸四切┓子事件壳岸忌胁磺宄淮送猓琋蚈纳镅匦砸灿写徊讲鳌本文第一部分工作是建立少突胶质细胞定向诱导的方法。我们在先前建立的分离和培养大鼠胚胎神经干细胞技术的基础上,借鉴他人报道的方法并加以改进,建立了利用伽从大鼠胚胎定向诱导的技术。在逐步添的同时,我们还同时添加,增加了的存活和增殖,使诱导出的纯度高达%以上。这些诱导而来的显示双极或多极形态,表达特异性标志和,在存在下迅速增殖形成少突细胞球,并可扩增数代而保持其表型特征不变。撤除经元的轴突形成髓鞘,使神经元之间电绝缘,有利于神经信号的快速传导,并重要因素。生长因子是最重要的细胞外分化信号之一,最近有研究证明,可分化为的条件下则分化为型星型胶质细胞。研究所替代。更有趣的是,最近确⑾郑珺也可直接诱导定向分和后,这些细胞分化为导加~
论文第三部分主要研究了在少突胶质细胞分化中的作用及其机制。这些结果表明,通过这种诱导方法能够获得大量高纯度的,为下一步对其进行生物学特性和临床细胞移植治疗研究打下了良好的基础。本文第二部分工作是通过基因差异表达研究和的分子特征,并由大鼠胚胎盏汲龈叽慷鹊腛缓罄胏⒄罅屑际踝魑之间基因表达谱的异同。在个被检测基因中,共发现个差异表达的基一步验证了部分基因,表明微阵列结果能准确反映和分子表达代谢和转运体;渌F渲邪ㄒ恍┛赡芊从砃蚈煌肿由学特性及涉及诱导过程中重要分子事件的基因,如血小板源生长因子受体、乙酰胆碱受体⒃刂鞍譊、话肴樘恰窬0钒了我们对发育和分化过程的理解,也为我们下一步研究奠定了基础。—是最有力的丝裂原之一,当与联合应用时可使持续地自我更新,而阻止其分化为成熟的S醒芯勘砻鳎蠵淮拥腂可作为指导信号诱导定向分化到系,我们第二部分的研究结果也证明,蛟贠械谋泶镌对陡哂贜,提示—也可能在向分化中起关键作用。我们通过细胞培养证明,在存在条件下,—确实能刺激大鼠胚胎优先分化为=幼牛颐墙徊街な礟狝因子猯和猨。此外,我们还发现,与对照相比,在—刺激两天的中被认为是发生所必需的转录因子泶锷系鳌9榻崞鹄矗颐堑结果证明,—是诱导向只闹匾5鹘谝蜃樱霉逃蒃信探讨只姆肿踊啤J紫龋颐窃擞糜玫谝徊糠止ぷ鹘⒌挠盏挤椒ǎ研究平台,通过相应的生物信息学手段,分析了和由其直接分化而来的因,其中,个基因在中上调,个基因在中下调。—治鼋的差异。基于潜在的功能特性,我们将这些差异表达的基因分为五类:胞表面抗原;芴搴屯ǖ溃原癌基因、转录激活剂和信号蛋白;乳糖基转移酶⑺枇字鞍字实鞍疍、生长相关蛋白一一取U庑┙峁兄谖颐橇私釴蚈涞姆钟璨畋穑由导的分化由皇荘藕磐揪督榈肌8霉袒股婕傲礁鲋匾5淖B騁的或虯的型星型胶质细胞上臻第