文档介绍：上海交通大学
硕士学位论文
CaCl<,2>诱导的大豆花粉管通道农杆菌转基因研究
姓名:李卉
申请学位级别:硕士
专业:作物遗传育种
指导教师:武天龙
20070101
CaCl2 诱导的大豆花粉管通道农杆菌转基因研究
符号说明
卡那霉素 Kan Kanamycin
利福平 Rif Rifamycin
链霉素 Str Streptomycin
硫酸庆大霉素 Gen Gentamicin
LB 培养基 LB Luria-Bertani
MS 培养基 MS Murashige and Skoog
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CaCl2 诱导的大豆花粉管通道农杆菌转基因研究
学位论文原创性声明
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本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。
学位论文作者签名:李卉
日期: 2007 年 1 月 12 日
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CaCl2 诱导的大豆花粉管通道农杆菌转基因研究
上海交通大学
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本学位论文属于
不保密□√。
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学位论文作者签名:李卉指导教师签名:武天龙
日期:2007 年 1 月 12 日日期:2007 年 1 月 12 日
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CaCl2 诱导的大豆花粉管通道农杆菌转基因研究
CaCl2 诱导的大豆花粉管通道农杆菌转基因研究
摘要
为了提高大豆花粉管通道法转基因效率,研究直接用农杆菌转
化方法的可行性,以秋大豆品种上海本地青为受体材料,用花粉管通
道法在三种 CaCl2 浓度水平下进行质粒 pCAMBIA3301 转化,又以
GV3101、LBA4404、EHA105 三种农杆菌菌株直接导入花粉管通道为处
理进行了遗传转化。以质粒为外源基因平均结实率为 %,T0 代种
子平均成活率为 %,T1 植株喷施除草剂后平均存活率为 %。
以农杆菌直接转化平均结实率为 %,T0 代种子平均成活率为
%,T1 植株喷施除草剂后平均存活率为 %。对存活的植株提
取 DNA 进行 PCR 检测,以质粒为外源基因的处理共获得 20 株转化苗,
三种 CaCl2 浓度水平的转化效率分别为 %、%、%,有两
种水平的转化效率约为传统转化效率的三倍。以农杆菌直接转化的处
理共获得 5 株转化苗,转化效率分别为 %、%、%。对获
得的第 T1 代种子用除草剂进行选择处理和对转化苗进行 PCR 检测表
明,利用花粉管通道法可以得到预期的目的基因片段,初步表示外源
基因已经整合进大豆中。
关键词:花粉管通道法,转基因,大豆,农杆菌,CaCl2,pCAMBIA3301
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CaCl2 诱导的大豆花粉管通道农杆菌转基因研究
TRANSFORMING AGROBACTERIUM INTO SOYBEN BY MEANS OF
POLLEN TUBE PATHWAY INDUCED BY CaCl2
ABSTRACT
In order to improve transgene efficiency of pollen tube pathway, and
study the possibility of direct transformation of Agrobacterium,
pCAMBIA3301 at 3 concentration levels of CaCl2 was transformed into
Shanghai Bendiqing Soybean receptors by means of pollen tube pathway,
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