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学位论文惜引艏学位论文懈否/。耗晔拢日日期:年∥月/原创性声明学位论文使用授权声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。
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摘要油菜不仅是我国,同时也是世界上重要的经济作物和主要的食用油来源,是仅次于大豆的重要植物油脂的来源,也是当今世界上发展最快的多用途作物之一。目前,我国的油菜栽培面积、产量虽均居世界首位,但其单产却远远低于德国、丹麦等欧洲高产国家。近几十年来,随着人口的不断增加,环境的急剧恶化及耕地的逐渐减少,人口与土地之间的矛盾也日益加剧。因此,培育出超高产油菜成为当下我国油菜生产最主要的研究任务。但是由于常规的遗传改良育种方法所需的时间较长,工作量大,天然突变体难以发现,诱变育种具有不确定性,并且发展潜力也相当有限等因素,所以人们已经开始寻求其它能突破常规育种障碍的新技术。随着分子生物学的不断发展和转基因技术的日趋成熟,利用基因工程技术获得期望的优良作物品种已成为现阶段遗传改良工作者首选的育种途径。细胞分裂素能促进营养物质的定向运输,在种子和果实的发育过程中能促进坐果,影响果实和种子中同化物的积累,此外还具有促进胚乳的发育,以及具有增大果体的功能。因此利用基因工程手段,调控内源细胞分裂素含量,为进一步提高油菜产量提供了新的方向。本实验利用细胞分裂素合成关键酶基因隢筒酥肿哟⒉氐鞍基因的启动子融合构建的、在种子发育时期,特异表达的蛑参锼1泶镌靥澹榈加筒艘糯化,使得蛟谟筒酥肿拥姆⒂逼谔匾煨愿咝П泶铮云谠黾佑筒酥肿有成时期内源细胞分裂素的含量,从而提高营养物质向种子定向运输的效率,为提高油菜的灌浆速度,进一步培育出超高产油菜种质奠定基础。研究的主要内容和结果如下:⒏世缎陀筒宋蘧缗嘌逑档慕种子洗去表面浮土和残种后,%酒精洗涤玪蘧~危甀%,无菌水洗危螅又钟谥肿臃⒀颗嘌培养基%%,污染率为此处数据皆为以中双盼J笛椴牧鲜钡氖。⒁宰右逗拖屡咧嵛M庵蔡宓母咂翟偕逑到以苗龄斓挠筒俗右逗拖屡咧嵛M庵蔡澹又练只嘌篗疞フ崽%琼脂粉,,可直接再生出芽,且再生./
暗培养后,用含琇腗禾迮嘌竦赐丫蘧逑打频率达到ィ唤又辽嘌/フ崽%,生根率亦达到ァ⒂行б种谱右逗拖屡咧嵊朔只纳秆⊙古ǘ鹊娜范将油菜无菌苗子叶和下胚轴分别接种到有不同ǘ鹊姆只嘌校并测试其对愈伤诱导所产生的抑制效果。结果发现,抑制油菜外植体愈伤分化的筛选压ǘ任疞。⒏┡└司榈嫉挠筒艘糯;逑档慕油菜的最适转化条件:切取油菜无菌苗的带柄子叶,柄长,下胚轴长约,,用无菌滤纸吸干其表面水分,然后接入延迟培养基上,延迟筛选后,转入分化筛选培养基上进行筛选,得到长约左右的的芽时,将其切下接入生根培养基,待苗长至夷苷I币圃裕⒍阅芄徽I目性苗做进一步鉴定。⒆;仓曜橹Ъ觳饧癙检测剪取转化植株幼嫩部位的叶片,做橹旧ǎ昕剐悦缰校株的叶片,被染成蓝色,初步证明了外源基因已经插入到受体植物的基因组中;觳饨峁允荆昀┰龀鲇胙粜远哉障嗤奶醮徊街っ髁外源基因已经成功整合至油菜基因组中。关键词:油菜;异戊烯基转移酶基因舳樱桓┡└司摘要
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