文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
二硫化二砷对CML细胞的作用及其机制
姓名:李俊娥
申请学位级别:博士
专业:内科学(血液病学)
指导教师:孙关林

————一圭塑苎三堕型查兰堕圭兰苎限性拖年来,新药适溃甘芡瞥纾靡蛋白,这是⒉〉姆肿踊!娉卦诎籽2≈性颊ィ引起了国内外学者对砷剂治疗白血病作用的再度关注。\回顾上月运柘赴籽2∠赴淖饔眉捌浠蒲芯是一种严重威胁人类健康的恶性疾病,其特征是第藕偷号染色体断裂、—岁。其病程分为三期,慢性期、加速期和急可抑制狝酪氨酸激酶活性,选择性强,副作用较轻,被认为是治疗睦硐胍┪铩5ň荼ǖ栏靡┒约北淦诨颊吡效较差,细胞、分子遗传学检查显示尚不能根除恶性克隆,治疗I细鍪兰甏虾J邪籽2》乐巫橛τ弥幸牛黄解毒片尚刍频茸槌桑刍频闹饕3煞质茿篠治疗〉谩菩В崾続可能具有治疗淖饔茫中文摘要慢性髓细胞性白血病变期,中位生存期一般仅为辍6訡的治疗目前以化疗、┲瘟品椒ㄉ杏幸欢ǖ木疗后易复发等。因而,继续寻找新的治疗囊┪锶允茄究闹饕?翁庵ā近年来,我国学者使用虯。治疗急性早幼粒细胞白血病〉孟灾菩В涠靖狈从σ话憬锨幔蚨个世纪初,疭液饕3煞质潜嵘樗峒已被用于治,、,/
提供实验依据。,乒、/为观察訡细胞的作用,以赴闗第一部分月运柘赴匝2∠赴淖饔疞作用荊谙赴,作用后,亚%。提示,:作用笆鱿赴蛲雎食始亮恳览敌缘卦龈据此,提出本课题进行研究,其结果将为:毫俅仓瘟艭本研究包括两部分内容:第一节、ザ蓝訡细胞的作用细胞作为研究模型。结果发现谂ǘ—疞能抑制细胞的增殖。疞以上能明显抑制细胞活力,流式细胞仪分析细胞周期显示,饔、,亚期蛲龇细胞数均为疞作用‘哑期细胞数为饔时,。进一步取颊吖撬璧ジ龊讼赴畉疞疞时,细胞凋亡率依次为±%、.ズ%。疞作用,细胞凋亡率呈时间依赖性地增高.、时,.%>、上海第二二医科大学博郝畚,畉、
厂是近来公认的治疗籽2〉挠行б┪铮捎和赴蛲雎史直鹞%,.%。太。说明苡盏糃赴蛲觥N1冉蟨核细胞作为。细胞模型,,=峁允続对淖饔美嗨贫缘ジ龊讼赴淖饔茫浯俚蛲鲎饔猛和一细胞对舾行缘牟钜欤杖例颊吖撬璧ジ率,和赴啾龋跫拢琍5ジ龊讼赴蛲雎均低于颊叩ジ龊讼赴蛲雎剩琹饔,.%.ヒ。且恢掷奂霸煅8上赴降亩裥约膊。珻细胞是一群造血干祖细胞。在十患者中,%的细胞具有染色体,因而,选择颊逤细胞进行研究,其结果将较客观地反映药物对饔玫谋局省;于此,进一步观察了訡赴淖饔谩时间和剂量有关,对照组、饔,%。疞作用第二节、隨嫌枚訡细胞的作用效抑制狝的钚裕欢约铀倨诤图北淦诨颊咧瘟效果尚不满意。因而,本文观察隨嫌枚訩和癿/.ズ.%。疞和疞、癿/疞上海第二医科大学博畚/
=岷系谝徊糠纸峁而两者合用,,研究结果显示,蚐嫌糜第二部分盏糃细胞凋亡机制的研究理珺—廾飨愿谋洌后,瓵明显降低,±%;而两者合用细胞凋亡率上升为.%。显示了协同作用。对细胞,单用,,,。在不同剂量组饔疞处理无明显减少,疞作用后,明显降低,疞作用后,进一步降低。在不同时间组疞疞作用疞作用出现明显的细胞凋亡现象,提示,.。饔肒赴梢越档虰蛋白含量,使猘和瓵的钚约醯停鳶抢野彼峒っ敢种萍粒它呵有效抑制腜活性,但不能减低瓵的蛋和/\5诙娇拼笱Р┦柯畚畉、/
前,它们均可能参与了盏嫉蛲龅幕啤瓵诱导细胞凋亡的其它机制8嗔私釧诱导细胞醒芯咳衔I榛衔细胞凋亡作用比分别单用要强。的产生和降低线粒体跨膜电位白含量,两种药物虽然作用机制并不完全相同,但均可抑制凋亡的机制,用産蚏甈筛查了一些信号传导分腜活性。因而,蚐:鲜褂糜盏糑瓵增加细胞内活性氧类可消耗线粒体巯基,增加牟鳵可诱导细胞凋亡。砷剂还可直接作用于线粒体,引起慕撸珹崩塌,释放细胞色素鹣赴蛲觥1疚囊饔细胞∈保鄄霷含量和的动态变化,采用蚫两种荧光探针双标,前者检测,后者检测浚褂肁叫屑测细胞凋亡率。结果显示,饔∈盧含量即开始上升,盧增高已较明显,尔后继续增加:而△的降低则从J迹时已较明显,以后继续降低;细胞凋亡出现的时间在毯蟮蛲鱿赴恐鸾ピ黾印从时相上看,饔靡鸬腞的增加和△