文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
干细胞和培养角膜上皮层移植眼表重建的实验研究
姓名:李瑾
申请学位级别:硕士
专业:眼科学
指导教师:范先群

㈧糕干细胞和培养兔膜上皮层移植眼表重建的实验研究本实验用体外培养角膜缘干细胞构建培养角膜上皮层,对严重眼表损伤动物进行培养角膜上皮层移植,观察治疗效果。并根据干细胞级动物模型,对各级分别采用不同术式进行眼表重建,观察治疗效果,观察培养角膜上皮层治疗严重眼表损伤的效果。根据干细胞损失损动物模型行培养角膜上皮层移植术,观察术后角膜形态改变,进行根据干细胞损失程度将以角膜缘干细胞受损为特征的眼襄损伤摘要关键词:羊膜角膜缘干细胞培养角膜上皮层眼表重建以角膜缘干细胞损伤为特征的眼表疾病,发病率高,治疗困难,是目前急需解决的临床难题。不同程度和范围的角膜缘受损导致不同程度的眼表损伤,其治疗方法也不相同。而用体外培养角膜缘干细胞构建角膜上皮层作为移植的来源进行眼表重建,目前已成为研究的热点。损失程度对以角膜缘干细胞损伤为特征的眼表疾病进行分级,建立各探索最佳治疗方法。目的程度对以角膜缘干细胞受损为特征的眼表损伤进行分级。探索各级眼表损伤的最佳治疗方法。材料和方法组织块种植法获得兔培养角膜上皮层,对新西兰大白兔角膜缘受组织病理学和免疫组织化学检测。分为三级,手术方法建立各级动物模型。对各级眼表损伤分别采用羊干细胞和培养角膜上皮层移植限表重建的实验研究
膜移植术、羊膜联合自体角膜缘移植和培养角膜上皮层移植进行眼表正常生理条件下的角膜上皮结构相近,能正常表达角膜上皮特异性角⑹质醴椒ㄇ谐锏ジ糠只蛉ú拷悄ぴ导敖悄ど掀ず螅⒍杂贗级眼表损伤,羊膜移植和羊膜联合自体角膜缘移植术后效果无显著差异;对于级眼表损伤,羊膜联合自体角膜缘移植术后获得稳定眼表面;对于蚣堆郾硭鹕耍嘌悄ど掀げ阋浦彩鹾蠡词导矢上赴鹗У某潭瓤山山悄ぴ蹈上赴芩鹨鸬难重建,评价治疗效果。结果⑴嘌悄ど掀げ阋浦彩鹾笸醚郾砻嫫秸榷ǎ悄ぶ醒胛醇新生血管生长。组织学检查证实移植后角膜上皮由多层细胞构成,与蛋白。后天观察到相对应范围的角膜结膜上皮化出现、角膜混浊和新生血管长入。按干细胞损失的程度建立眼表损伤动物模型,分别为叮。的角膜缘受损;级:!。的角膜缘受损;叮5慕悄ぴ凳芩稹得稳定眼表面。结论嘌悄ど掀げ阋浦彩蹩梢曰指唇悄ど掀そ峁沟耐暾裕少新生血管形成,维持角膜缘的细胞屏障功能,能有效治疗以角膜缘干细胞受损为特征的眼表损伤。表损伤分为三级,分别为叮骸。以下的角膜缘受损;级:!。的角膜缘受损;叮5慕悄ぴ凳芩稹堆郾硭鹕说氖籽∈跏绞茄蚰ひ铺矗籌堆郾硭鹕说那跹术式是羊膜联合自体角膜缘移植术:堆郾硭鹕说氖籽∈跏绞桥嘌角膜上皮层移植术。≤干细胞和培养角膜上皮层移植眼表重她的实验研究
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引言受损、干细胞缺乏的眼表损伤尤为严重。由于缺损范围大,周围的上皮细发病率高、治疗困难的顽固性致盲眼病,长期以来一直是眼科医师所面临随着医学科学的进步,人们对眼表疾病进行了许多新探索,提出并研究了一些眼表重建的手术方法,如自体结膜移植术、口唇粘膜和硬腭粘膜移植所重建的眼表往往不够理想。年等在角膜缘干细胞概念的基础上,创立了角膜缘移植术。年,谕没丈四P偷慕悄け砻覆盖单层羊膜,发现角膜恢复透明,移植羊膜表面产生角膜上皮化和角膜型角蛋白的表达,认为羊膜能促进眼表上皮的增生和分化。羊膜载体的应羊膜移植眼表重建能有效修复和稳定受损的眼表,为进一步的复明手术创造条件。现在,许多学者又在进行培养的角膜上皮层移植的研究,认为这眼表是维护眼球健康和维持清晰视觉功能的重要结构,正常眼表由角膜、角膜缘及结膜上皮共同覆盖来维持其完整的结构及功能。各种眼表疾病、外伤以及眼表肿瘤切除术后均能造成大面积的眼表上皮缺损,其中由热化学烧伤、单疱病毒感染、复发性翼状胬肉等严重眼表疾病导致角膜缘胞移行不足以修复整个缺损区,往往产生瘢痕愈合,继发睑球粘连,角膜混浊,严重者将对视功能造成严重损害,甚至失明。严重眼表疾病是一种的最大挑战之一。眼表重建术是治疗眼表疾病的重要手段,其目的是恢复眼表面的完整性,防止眼表面新生血管和假性胬肉侵入,并促进患眼视力恢复。近年来,术、角膜上皮移植术等,虽然取得一定的疗效,但存在较多局限性,因此用是近年发展的重建眼球表面的一项新技术,国内外已逐渐应用于临床。项研究的完成有望为解决眼表重建材料来源提供一条新的途径,为角膜缘干细胞严重缺失的眼表疾病患者带来福音。干细胞和