文档介绍:常规检查(血常规、尿常规、粪便常规)
临床兽医学教研室内诊组
内容
实验目的与要求
1
血常规
2
尿常规
3
粪便常规
4
目的与要求
掌握血红蛋白测定、红细胞及白细胞计数的操作方法与注意事项。
掌握尿液化学检查方法。
掌握粪便酸碱度及粪便潜血检查的方法。
一、血红蛋白测定(Hb):沙利氏法
1、原理:
盐酸与血红蛋白结合形成盐酸高铁血红蛋白而变为褐色,通过与标准比色柱比色,可测得血红蛋白的含量(g/L)。
2、试剂与设备:① 1%盐酸(白细胞稀释液);②沙利氏血红蛋白计。
3、方法:
将1%盐酸注入血红蛋白测定管内的刻度20%处。用沙利氏吸管精确吸取20微升血样,用脱脂棉擦去外壁附着血液后将其吹入测定管内,并反复吸吹数次,用小玻棒摇匀,静置5~10min。然后用蒸馏水稀释至测定管内颜色与标准比色柱颜色一致为止。读取液体凹面处刻度,即为100ml血液所含血红蛋白百分数或克数。
4、注意事项
①该法测定Hb的读数单位为g/100ml血液。
②用Hb吸管吸取血样前后均应及时将Hb吸管用三样瓶进行冲洗干净。
冲洗顺序为:水酒精乙醚
5、正常参考值
各种动物血红蛋白正常值在90~120g/L。
①血红蛋白增多:主要是见于脱水,血红蛋白相对增加。也见于真性红细胞增多症,是一种原因不明的骨髓增生性疾病,目前认为是多能干细胞受累所致。其特点是红细胞持续性显著增多,全身总血量也增加,见于马、牛、犬和猫。
②血红蛋白量减少:主要见于各种贫血。
二、红细胞计数(RBC) :显微镜计数法
1、原理
血液经200倍稀释后,充入血细胞计数板,用显微镜观察,计数一定容积内的红细胞数并换算成每升血液中的红细胞数。
2、器材与试剂
改良纽巴氏计数板、盖玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、试管、小玻棒、显微镜、计数器、%氯化钠稀释液。
3、方法
①用5毫升吸管准确吸稀释液2毫升于试管中,用沙利氏吸管吸取血样10微升,用脱脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入试管底部,轻轻压出血液于稀释液中,再用上清液吸、吹数次,以洗出沙利氏管内黏附的血细胞,充分混匀后备用。
②将稀释后的血样用小玻棒取一滴,置于计数板与盖玻片交界的边缘,让其自然浸入,使稀释血样扩散入计数室内,静置2~3分钟,镜检。
③计数时用低倍镜,依次计数中央大方格内的四角和正中5个中方格,共80个小方格的红细胞数。为避免重复和遗漏,计数时应按一定顺序进行。注意压在双线上的红细胞,遵守“数左不数右,数上不数下”计数法则。
4、计算方法
每mm3血液内红细胞总数
= 5个中方格内红细胞数×5×10×200×106
= 5个中方格内红细胞数×1010
单位:个/升
式中×5 — 5个中方格换算成1个大方格
×10 — ,
×200 —血液的稀释倍数
×106 —由微升换算成升
注意防凝、防溶、取样正确。
5、正常参考值
健康动物除山羊的红细胞数较多外,×1012~×1012/L。
6、临床意义
①相对增多:脱水、急性胃肠炎、肠便秘、渗出性胸膜炎、渗出性腹膜炎、某些传染病;
②绝对增多:红细胞增多症,见于代偿性机能不全的心脏病及慢性肺部疾病;
③减少:各种贫血、出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性贫血、营养不良性贫血、继发性贫血。
三、白细胞计数(WBC) :显微镜计数法
1、原理:
用白细胞稀释液破坏红细胞后,混匀充入计数池中,在显微镜下计数一定容积中的白细胞数,经换算求得每升血液中的白细胞总数。
2、试剂与设备:
改良纽巴氏计数板、盖玻片、沙利氏吸管、1ml吸管、试管、小玻棒、显微镜、计数器、白细胞稀释液(2%冰醋酸溶液或1%盐酸溶液)。